老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制
，同时
，可以施加化学、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察
，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜
、流式细胞术
、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备
。
​
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法

； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率

； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干

。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞
，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基
；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2
、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞
，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存
。

α－对羟基苯 CAS  规格
：30mg 订购|咨询

苦蒿素;Blinin CAS 125675-09-4 规格

：20mg 订购|咨询

28-去甲基-β-香树脂 CAS  规格：HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

补骨脂二氢黄甲 CAS 19879-30-2 规格：20mg 订购|咨询

白芷 CAS  规格：1g 订购|咨询

4-β-D-葡萄糖基-1,3,7-三羟基 CAS 81991-99-3 规格
：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

马来酸 CAS 110-16-7 规格：20mg 订购|咨询

查斯马宁 CAS 5066-78-4 规格：20mg 订购|咨询

去氢木香内酯 CAS 477-43-0 规格：20mg 订购|咨询

喹乙醇;纯品型;标准品;有证书 CAS 23696-28-8 规格：0.1g 订购|咨询

雷帕;Sirolimus CAS 53123-88-9 规格：20mg 订购|咨询

SPC-A1细胞，人肺腺癌细胞价格跨膜蛋白SEMA5A抗体 英文名称：Semaphorin 5A 0.2ml

IQCJ抗体 英文名称：SCHIP1 0.1ml

SH2结构域蛋白C3抗体 英文名称
：SHC3 0.2ml

2型猪链球菌溶血素抗体 英文名称：streptococcus suis Suilysin 1ml

肺表面活性蛋白A抗体 英文名称：SP-A 0.1ml

葡萄糖-6磷酸转运蛋白抗体 英文名称：SLC37A4 0.2ml

肺表面活性蛋白A抗体 英文名称
：SP-A 0.1ml

线粒体琥珀酸脱氢酶D抗体 英文名称：SDHD 0.1ml

类固醇硫酸酯酶抗体 英文名称：Steroid sulfatase 0.1ml

固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白抗体 英文名称：SCAP 0.2ml

转运蛋白家族39成员7抗体 英文名称：SLC39A7 0.2ml