培養操作步驟  ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出 ，用無菌絲綢布擦拭幹淨 ，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養板（每孔一片）或培養皿中（每個平皿可放置2-3片） ； 
3．在距離紫外燈直射範圍內20-30 厘米處照射2-3小時 ； 
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中 ，使蓋玻片*浸在培養液中 ； 
5．將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天 ，當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3麵積時 ，將培養板取出 ，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片 ，用蒸餾水漂洗後即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測 。 

下列是產品的訂購信息 ：

細胞培養的優點 ：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中 ，根據要求可始終保持細胞活力 ，並可長時間監控 、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況 ，包括活細胞的形態 、結構 、生命活動等 。
2.研究條件可以人為控製
pH 、溫度 、氧氣 、二氧化碳、張力等物理化學的條件 ，可以根據實際需要進行人為的控製，同時 ，可以施加化學 、物理 、生物等因素作為條件而進行實驗觀察 ，這些因素同樣可以處於嚴格控製之下 。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數後 ，所得到的細胞係則可以達到均一性而屬於同一類型的細胞 ，需要時 ，可采用克隆化等方法使細胞達到純化 。
4.研究內容便於觀察 、檢測和記錄
采用各種研究技術 ：如倒置生物顯微鏡 、熒光顯微鏡 、電子顯微鏡 、流式細胞術 、激光共焦顯微鏡 、免疫組織化學 、原位雜交 、同位素標記等各種儀器設備 。
​
實驗要點及說明 ：
1．本方法適用於貼壁細胞培養 ，而不適用於懸浮細胞培養 ，懸浮細胞可使用滴片法 ； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃 ，並經過鉻酸洗液處理 ； 
3．蓋玻片非常薄 ，易碎 ，取放蓋玻片時動作要輕 ； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞 ，可以使用較大的培養皿 ，但不宜過大 ，以避免培養液的浪費和增加汙染機率 ； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差 ，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹 。

細胞培養方法 ：
1 、細胞傳代 ：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清 ，用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ；
②加入2ml0.25%（T25瓶） ，使覆蓋整個瓶或皿 ，蓋好放入培養箱消化 ；
③1-2min後 ，顯微鏡下觀察細胞 ，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ，輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化 ；若細胞還是貼壁 ，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止 ；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ，棄上清 ；
⑤用新鮮培養基重懸後加入培養瓶或皿中 ，T25培養瓶加6-8ml培養基 ；
⑥懸浮細胞直接離心收集 ，細胞沉澱重懸後分到新培養瓶中 。
2 、細胞複蘇 ：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化 ，時間1min左右 ，加入4-5ml培養基混勻 。
②在1000RPM左右條件下離心4min ，棄上清,加1-2ml培養基吹勻 ，將細胞懸液加入培養瓶中 ，補加適量培養基 。
3 、細胞凍存 ：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清 ，用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min後 ，顯微鏡下觀察細胞 ，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ，輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒 ，放入-80℃冰箱，4小時後將凍存管轉入液氮罐儲存 。

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多索 CAS 69975-86-6 規格 ：100mg 訂購|谘詢

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