老哥俱乐部

细胞培养方法：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁
，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中
，补加适量培养基
。
3
、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清

，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后
，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

下列是产品的订购信息
：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件
，可以根据实际需要进行人为的控制，同时
，可以施加化学、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞
，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交
、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）
； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中
，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天

，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄
，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿，但不宜过大
，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

木犀草素 CAS 491-70-3 规格：20mg 订购|咨询

磷酸因 CAS  规格：50mg 订购|咨询

圣草酚 CAS 552-58-9 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

化木兰花碱 CAS  CAS:2141-09-5 规格

：HPLC≥98%;10mg 订购|咨询

对照药材 CAS  规格：1g 订购|咨询

木香烃内酯 CAS 553-21-9 规格：20mg 订购|咨询

芦荟大黄素;Aloeemodin CAS 481-72-1 规格
：20mg 订购|咨询

白杨素 CAS 480-40-0 规格：HPLC≥98%;20mg 订购|咨询

异甘草素 CAS 961-29-5 规格
：20mg 订购|咨询

益智(益智仁) CAS  规格：1g 订购|咨询

愈创木酚 CAS 32994 规格：20mg 订购|咨询

L1细胞，卵巢癌细胞规格线粒体钠/氢交换蛋白质2抗体 英文名称：NHEDC2 0.2ml

神经元素1抗体 英文名称
：Neurogenin 1 0.2ml

神经肽Y抗体 英文名称：Neuropeptide Y 0.1ml

神经营养因子抗体 英文名称
：Neurturin 0.1ml

受体2B抗体 英文名称
：NMDAR2B 0.1ml

受体2D抗体 英文名称：NR2D 0.1ml

神经纤毛蛋白2抗体 英文名称
：Neuropilin 2 0.1ml

原癌基因N-Ras抗体 英文名称：NRAS 0.1ml

T细胞激活核转录因子4抗体 英文名称：NF-ATc4 0.1ml

脑低密度脂蛋白受体蛋白1抗体 英文名称：NETO1 0.2ml

轴突蛋白2抗体 英文名称

：Neurexin 2 0.2ml