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RK-13細胞
,兔腎細胞係供應商

產品名稱 :RK-13細胞 ,兔腎細胞係供應商

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產品型號 :

更新日期 :2021-03-29

訪問次數 :377

RK-13細胞 ,兔腎細胞係供應商的詳細資料 :

培養操作步驟  :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出 ,用無菌絲綢布擦拭幹淨 ,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個平皿可放置2-3片) ; 
3.在距離紫外燈直射範圍內20-30 厘米處照射2-3小時 ; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養板中 ,使蓋玻片*浸在培養液中 ; 
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天 ,當貼壁細胞生長至覆蓋培養板底部2/3麵積時 ,將培養板取出 ,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片 ,用蒸餾水漂洗後即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測 。 

下列是產品的訂購信息 :

產品名稱

RK-13細胞 ,兔腎細胞係供應商

英文名稱

RK-13 cells, rabbit kidney cell line

貨號

EY-X64205

細胞培養的優點 :
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中 ,根據要求可始終保持細胞活力 ,並可長時間監控 、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況 ,包括活細胞的形態 、結構 、生命活動等 。
2.研究條件可以人為控製
pH 、溫度 、氧氣 、二氧化碳 、張力等物理化學的條件 ,可以根據實際需要進行人為的控製 ,同時 ,可以施加化學 、物理 、生物等因素作為條件而進行實驗觀察 ,這些因素同樣可以處於嚴格控製之下 。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數後 ,所得到的細胞係則可以達到均一性而屬於同一類型的細胞 ,需要時 ,可采用克隆化等方法使細胞達到純化 。
4.研究內容便於觀察 、檢測和記錄
采用各種研究技術 :如倒置生物顯微鏡 、熒光顯微鏡 、電子顯微鏡 、流式細胞術 、激光共焦顯微鏡 、免疫組織化學 、原位雜交 、同位素標記等各種儀器設備 。

實驗要點及說明 :
1.本方法適用於貼壁細胞培養 ,而不適用於懸浮細胞培養 ,懸浮細胞可使用滴片法 ; 
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃 ,並經過鉻酸洗液處理 ; 
3.蓋玻片非常薄 ,易碎 ,取放蓋玻片時動作要輕 ; 
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞 ,可以使用較大的培養皿 ,但不宜過大 ,以避免培養液的浪費和增加汙染機率 ; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差 ,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鍾並自然晾幹 。

細胞培養方法 :
1 、細胞傳代 :細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清 ,用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ;
②加入2ml0.25%(T25瓶) ,使覆蓋整個瓶或皿 ,蓋好放入培養箱消化 ;
③1-2min後 ,顯微鏡下觀察細胞 ,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落 ,輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化;若細胞還是貼壁 ,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止 ;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ,棄上清 ;
⑤用新鮮培養基重懸後加入培養瓶或皿中 ,T25培養瓶加6-8ml培養基 ;
⑥懸浮細胞直接離心收集 ,細胞沉澱重懸後分到新培養瓶中 。
2 、細胞複蘇 :
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化 ,時間1min左右 ,加入4-5ml培養基混勻 。
②在1000RPM左右條件下離心4min ,棄上清,加1-2ml培養基吹勻 ,將細胞懸液加入培養瓶中 ,補加適量培養基 。
3 、細胞凍存 :待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清 ,用PBS或生理鹽水清洗1-2次 ,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min後 ,顯微鏡下觀察細胞 ,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養基終止消化 ;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min ,棄上清 ,加1ml凍存液重懸細胞 ;
④將凍存管放入程序降溫盒 ,放入-80℃冰箱 ,4小時後將凍存管轉入液氮罐儲存 。

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胰島素(間接法二步法)Ins 96T

 

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