老哥俱乐部

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力

，并可长时间监控
、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH
、温度、氧气
、二氧化碳
、张力等物理化学的条件

，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜

、荧光显微镜
、电子显微镜
、流式细胞术

、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 
：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出
，用无菌丝绸布擦拭干净

，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中
； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时
，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 
实验要点及说明：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法
； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞
，可以使用较大的培养皿，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

羊IgG苏云金芽孢杆菌 Bacillus thuringiensis

RL1(大鼠肺成纤维样细胞)5×106cells/瓶×2

高转移人肝细胞MHCC97-H

HBE(人支气管上皮样细胞)大豆慢生根瘤菌

人脑微血管内皮细胞褐球固氮菌 Azotobacter chrooccum

卡尔斯伯酵母 Saccharomyces carlsbergensisMiaPaCa-2, 人胰腺细胞

细胞毒性T-淋巴细胞关联抗原4(CTLA4)重组蛋白Recombinant Cytotoxic T-Lymphocyte Associated Antigen 4 (CTLA4)

V79(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2

成人成纤维细胞*培养基100mL

NCI-H716(人结直肠腺细胞)5×106cells/瓶×2gersion

TPY液体培养基 规格
： 250g 用途： 培养双歧杆菌用于果糖-6-磷酸盐磷酸酮酶（F6PPK）测定

B6YH4细胞
，杂交瘤细胞支原体阳性说明书前列腺特异性抗原PSA 96T

上皮类癌相关抗原CA50 96T

卵巢癌相关抗原CA125 96T

癌相关抗原CA153 96T

胰腺癌相关抗原CA199 96T

巨细胞病毒 IgM(间接法二步法)CMV

巨细胞病毒 IgG(间接法二步法)CMV

巨细胞病毒 IgM(捕获法一步法)CMV

巨细胞病毒 IgM(捕获法二步法)CMV IgM

风疹胞病毒 IgG(间接法二步法)RV

风疹胞病毒 IgM(间接法二步法)RV IgM

细胞培养方法：
1、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次
；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中

。
2、细胞复苏
：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀

。
②在1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3
、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次
，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。