產品名稱 :膽色素原脫氨酶ELISA檢測試劑盒
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產品型號 :48T/96T
更新日期 :2021-04-29
訪問次數 :420
48T/96T膽色素原脫氨酶ELISA檢測試劑盒的詳細資料 :
注 :本公司提供試劑盒免費代測服務 。需要其他檢測試劑盒請谘詢銷售人員 。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
膽色素原脫氨酶ELISA檢測試劑盒 | Porphobilinogen deaminase | EY-E99089 |
需要而未提供的試劑和器材
:
1. 產品僅用於科研標準規格酶標儀
2. 高速離心機
3. 電熱恒溫培養箱
4. 幹淨的試管和Eppendof管
5. 係列可調節移液器及吸頭
,一次檢測樣品較多時
,用多通道移液器
6. 蒸餾水
,容量瓶等
。
標本的采集與保存
:
1
、血清
:將收集於血清分離管的全血標本在室溫放置2 小時或4oC 過夜
,然後1000×g 離心20 分鍾
,取上清即
可
,或將上清置於-20oC 或-80oC 保存
,但應避免反複凍融
。
2
、血漿
:用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本
,並將標本在采集後的30 分鍾內於2-8oC 1000×g 離心15 分鍾
,
取上清即可檢測
,或將上清置於-20oC 或-80oC 保存
,但應避免反複凍融
。
3
、組織勻漿
:
1) 取適量組織塊
,於預冷PBS(0.01mol/L, pH 7.0-7.2)中清洗去除血液
,稱重後備用(組織塊較大需先剪碎後再勻漿)
;
2) 可同時選用多種勻漿方法達到較好的破碎效果
:首先將組織塊移入玻璃勻漿器
,加入5-10mL 預冷PBS 進行充分研磨
,該過程需在冰上進行(有條件實驗室可選用機器勻漿)
;得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反複凍融進一步處理(超聲破碎過程中注意冰浴降溫
;反複凍融法可重複2 次)
。
3) 將製備好的勻漿液於5000×g 離心5 分鍾
,留取上清即可檢測
。
4
、其它生物標本
:請1000×g 離心20 分鍾
,取上清即可檢測
,或將上清置於-20oC 或-80oC 保存
,但應避免反複凍融
。
操作步驟
:
夾心法
,一般的操作步驟為:
將具有專一性的抗體固著於塑膠孔盤上
,完成後洗去多餘抗體;
加入待測檢體
,檢體中若含有待測的抗原
,則其會與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結;
洗去多餘待測檢體
,加入另一種對抗原專一的一次抗體
,與待測抗原進行鍵結;
洗去多餘未鍵結一次抗體
,加入帶有酶的二次抗體
,與一次抗體鍵結;
洗去多餘未鍵結二次抗體
,加入酶底物使酵素呈色
,以肉眼或儀器讀取呈色結果;
間接法
,一般的操作步驟為
:
將已知的抗原固著於塑膠孔盤上
,完成後洗去多餘的抗原
。
加入待測檢體
,檢體中若含有待測的一次抗體
,則其會與塑膠孔盤上的抗原進行專一性鍵結
。
洗去多餘待測檢體
,加入帶有酶的二次抗體
,與待測的一次抗體鍵結
。
洗去多餘未鍵結二次抗體
,加入酶底物使酶呈色
,藉儀器測定塑膠盤中的吸光值
,以評估有色終產物的含量即可測量待測抗體的含量
。
競爭法
,其操作步驟為
:
將具有專一性的抗體固著於塑膠孔盤上
,完成後洗去多餘抗體
加入待測檢體
,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
加入帶有酶的抗原
,此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行專一性鍵結
,由於塑膠孔盤上固著的抗體數量有限
,因此當檢體中抗原的量越多
,則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少
,亦即
,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結
,即所謂競爭法之由來
。
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