老哥俱乐部

培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净
，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）

； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天
，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出
，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

下列是产品的订购信息
：

细胞培养的优点


：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中
，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况
，包括活细胞的形态、结构

、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下
。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时

，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术
、激光共焦显微镜
、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养，而不适用于悬浮细胞培养，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞

，可以使用较大的培养皿

，但不宜过大，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。

细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿
，盖好放入培养箱消化
；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止
；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中
，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集
，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀
。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基
。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落
，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清
，加1ml冻存液重悬细胞
；
④将冻存管放入程序降温盒
，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

Atractylenolide III 白术内酯III 73030-71-4  20mg

Prim-O-glucosylcimifugin 升麻素苷 80681-45-4  20mg

trans-o-Coumaric Acid 邻羟基肉桂酸 614-60-8  20mg

Tilmicosin 5g  瓶

Bavachinin 补骨脂二氢黄酮甲 19879-30-2  20mg

Sinomenine 青藤碱 115-53-7  20mg

α-Terpineol α-松油醇 10482-56-1  20mg

Magnoflorine iodide 化木兰花碱 4277-43-4  10mg

Berberine Hydrochloride 5g  瓶

Wilforlide A 内酯甲 84104-71-2  20mg

Anemoside B4 白头翁皂苷B4 129741-57-7  20mg

Phillyrin 连翘苷 487-41-2  20mg

CFSC-2G细胞

，大鼠肝星形细胞供应商肠道肽转运蛋白2/小肽转运蛋白2抗原PEPT2 (Peptide-transporters 2) 0.5mg

蛋白激酶R样内质网激酶抗原PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 0.5mg

纤维束蛋白同源物1/肌动蛋白集束蛋白/圆线虫紫癜 抗原FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 0.5mg

原C蛋白抗原Pepsinogen C peptide 0.5mg

过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α抗原PGC-1 Alpha(peroxisome proliferator-activated receptor- Gamma coactivator 1 Alpha) 0.2mg

抑制素/肿瘤抑制因子抗原PHB(Prohibitin) 0.5mg

颗粒蛋白前体抗原PGRN (progranulin) 0.5mg

蛋白激酶A(多肽)PKA(Protein Kinase A) 0.5mg

型纤溶酶原激活因子（多肽）PLAU/uPA (Plasminogen activator,urokinase) 0.5mg

平足蛋白抗原Podoplanin Protein 0.5mg

多囊肾蛋白1抗原Polycystin 1(Polycystic Kidney Disease 1) 0.5mg