老哥俱乐部

细胞简介
：

肾上腺髓质位于肾上腺中心。肾上腺髓质细胞分泌两种
：肾上腺素和
。肾上腺髓质细胞较大，呈多边形，围绕血窦排列成团或不规则的索网状，细胞内含有细小颗粒
。

细胞特性
：

1）组织来源于实验动物的正常肾上腺组织。

2)细胞鉴定
：神经特异性烯醇化酶（NSE）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV
、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式：梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 DELF原代 上皮 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

实验报告：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织

，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s
，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次

，直至组织被消化

；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5
、差速贴壁1h后

，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养
；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次

，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下

，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次

，每次10min，然后在室温条件下

，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜

；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

MMP-2ELISAKit

160kDa内含子结合蛋白抗体

IBP160

脆性X综合征相关蛋白AFF2抗体

AFF2

人甲状旁腺相关蛋白(PTHrP)elisa分析检测试剂盒

乳品酪蛋白比色法定量检测试剂盒

猪催产素(OT)elisa分析检测试剂盒

大鼠心肌营养素1(CT1)elisa检测试剂盒

MAPK/ERK激酶3重组兔单克隆抗体

MEKK3

1号染色体开放阅读框123抗体

C1orf123

T细胞受体α抗体  Anti-TCR alpha

环指蛋白146抗体  Anti-RNF146

蛋白多糖4/黑色素瘤相关蛋白抗体  Anti-NG2/CSPG4

等电压依赖性阴离子通道抗体  Anti-VDAC

Src激活和信号分子蛋白抗体

TOM1L1

D型天冬抗体

D.Aspartic acid

脂肪酸转运蛋白6抗体  Anti-SLC27A6/ACSVL2

骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子)  Anti-OPGL/RANKL/ODF

Pan ras抗体  Anti-Pan-ras

基质细胞生成素-1抗体(人)  Anti-TSLP (human)

胶体金标记的正常小鼠IgG

跨膜蛋白SEMA4D抗体  Anti-SEMA4D/CD100

罗丹明标记的小鼠抗兔IgM

Mouse Anti-Rabbit IgM / RBITC

小鼠肾上腺髓质细胞Fas活化激酶结构域蛋白1抗体

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担
。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞

，再900 rpm-1000 rpm离心3 min

，
，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿
。