老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用
、简便易行和成功率较高的原代培养方法
。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长
。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养

，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称
：小鼠肾足细胞

英文名称
：Mouse primary renal podocytes

组织来源
：肾脏组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

肾小球为血液过滤器
，肾小球壁构成过滤膜。肾小球过滤膜从内到外有三层结构：内层为内皮
、中层为肾小球基膜
、外层为上皮细胞层，上皮细胞又称足细胞
，其不规则突起称足突，其间有许多狭小间隙
，血液经滤膜过滤后，滤液入肾小球囊。在正常情况下，血液中绝大部分蛋白质不能滤过而保留于血液中，仅小分子物质如尿素
、葡萄糖、电解质及某些小分子蛋白能滤过。

肾足细胞即肾小球上皮细胞，它附着于肾小球基底膜的外侧，连同肾小球基底膜和肾小球基膜一起构成了肾小球血液滤过屏障。又由于正常成年机体的肾脏足细胞是一种终末分化细胞，体外培养的原代细胞不能增殖。

足细胞呈星型多突状
，胞体较大，由胞体伸出许多突起，呈指状交叉覆盖于肾小球基底膜外表面，并通过黏附分子和蛋白多糖分子与肾小球基底膜相连
。足细胞在正常情况下可以分泌肾小球基底膜的主要组成成分 IV型胶原和纤维连接蛋白,在促肾纤维化引资等刺激下还能分泌具有降解肾小球基底膜作用的基质金属蛋白酶和组织蛋白酶，从而在肾小球基底膜的代谢平衡中发挥重要作用。

细胞特性
：

1）细胞来源于实验动物正常肾脏组织。

2)细胞鉴定

：广谱角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%

。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV
、支原体、、酵母和
。

5)细胞生长方式
：不规则

，含足突细胞
，贴壁培养
。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 DELF原代 肾足 细胞培养体系 作为该细胞的培养基
。

取材→分离→培养和维持

1
、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖

，必须将现有的组织块充分散开
，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密
，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织

。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法
，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡
，使细胞团块得以较充分的分散
，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

DAPI染色试剂盒100T

人β-防御素1(DEFB1)elisa检测试剂盒

细胞ITK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

小鼠嗜酸性粒细胞过氧化物酶(EPX)elisa检测试剂盒

大鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)elisa检测试剂盒

细胞ATP生物发光法定量检测试剂盒

乳酸含量（LA）测试盒

红细胞可溶性膜蛋白（粗提）制备试剂盒

小鼠多肽YY(PYY)elisa检测试剂盒

血小板反应结构域蛋白7A抗体 THSD7A

液泡蛋白分选蛋白45A抗体 VPS45A

低密度脂蛋白受体相关蛋白12抗体（抑制肿瘤蛋白7） LRP12

短链脱氢还原酶13抗体 DHRS13

FITC标记人CD326 (Ep-CAM)单克隆抗体 human CD326/FITC

FLJ46536蛋白抗体 RUFY4/FLJ46536

硫辛酰连接酶2抗体 LIPT2

球蛋白E受体Fc ε RIγ抗体 FCER1G

4号染色体开放阅读框27抗体 C4orf27

7跨膜蛋白超家族成员1抗体 GPCR TM7SF1

激肽原1重链抗体 Kininogen 1

钾/钠超极化激活环核苷酸门控通道蛋白2抗体 HCN2

Ras蛋白特异核苷酸释放因子4抗体 RASGRP4

RNA相关结合蛋白MCG10抗体 MCG10

丝状肌动蛋白结合蛋白抗体 Afadin

突触结合蛋白12抗体 Synaptotagmin XII

大鼠WAP四二硫化物核心域蛋白1(WFDC1)elisa检测试剂盒

线粒体二羧酸载体蛋白20抗体  Anti-SLC25A20

碱性磷酸酶（AP）标记的兔抗大鼠IgG H&L

Rabbit Anti-Rat IgG H&L / AP

小鼠肾足细胞ERGIC1蛋白抗体

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行
。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用