細胞簡介 ：

結膜為一層薄而透明的粘膜組織 ，覆蓋在眼瞼後麵和眼球前麵 ，分瞼結膜 、球結膜 、穹窿部結膜 。由結膜形成的囊狀間隙分為結膜囊 。

細胞特性 ：

1） 組織來源於實驗動物的眼球 。

2) 細胞鑒定 ：結蛋白（Desmin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性 。 。

3) 經鑒定細胞純度高於90% 。

4) 不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5) 細胞生長方式 ：長梭形細胞 ，不規則細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 delf原代 成纖維 細胞培養體係 作為該細胞的培養試劑 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠白介素28A(IL-28A)檢測試劑盒  ，英文名 ： IL-28A ELISA Kit

Mouse ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 小鼠白介素9(IL-9)檢測試劑盒

ELISA 小鼠IgA(mouse IgA)  進口分裝

CLIAKitforILK-1(Humaniegrin-linkedkinase1)ELISAKit人整合素連接激酶1

通用型胱(cystine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitOSM大鼠抑瘤素M

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)

CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽) Protein

EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白

CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白

IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細胞介素-1β)(多肽抗原)

EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白

CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標簽) Protein

小鼠基質金屬蛋白酶抑製因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 人上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)檢測試劑盒

HumanleukocyteaigenA,HLA-AELISAKit 人類白細胞抗原A(HLA-A)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAV檢測試劑盒人抗甲型肝病毒IgG抗體(ai-HAV)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

植物0酸葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

Humanvimein,VIMELISAKit人波形蛋白(VIM)檢測試劑盒規格 ：96T/48T

大鼠結膜囊成纖維細胞小鼠表皮生長因子(mouse EGF)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠內皮素-1(mouse Endothelin-1)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin)   作用 ：   ELISA   規格 ：      進口分裝

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。