老哥俱乐部

细胞简介：

肾上腺髓质位于肾上腺中心
。肾上腺髓质细胞分泌两种
：肾上腺素和。肾上腺髓质细胞较大
，呈多边形
，围绕血窦排列成团或不规则的索网状，细胞内含有细小颗粒。

细胞特性
：

1）组织来源于实验动物的正常肾上腺组织。

2)细胞鉴定：神经特异性烯醇化酶（NSE）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%
。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV
、支原体、

、酵母和。

5)细胞生长方式：梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 Delf 原代上皮 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基
。

实验报告
：

一
、分离与培养
：

1
、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min
，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3
、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次


，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液

，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定
：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min


；

3
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜
；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min
，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h

；

6、用PBS冲洗3次
，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

BMPR-1AELISAKit

仓鼠瘦素(LEP)elisa分析检测试剂盒

LEP ELISA kit

人端粒保护蛋白1(POT1)elisa分析检测试剂盒

HumanPOT1ELISAkit

人腺二核苷酸磷酸（NADPH）elisa检测试剂盒

蜂蜜海藻糖比色法定量检测试剂盒

线粒体膜蛋白提取试剂盒100T

大鼠一氧化氮合成酶(NOS)elisa检测试剂盒

干扰素α6抗体

Interferon alpha 6

6号染色体开放阅读框151抗体

C6orf151

细胞脯氨酰肽酶（prolinase）比色法定量检测试剂盒

土壤无机磷（S-PHOS）含量测试盒

大鼠母系胚胎亮拉链蛋白激酶(MELK)elisa检测试剂盒

白细胞培养液

核糖核酸结合蛋白2抗体

PTBP2

干扰素α8抗体

Interferon alpha 8

泛素蛋白连接酶L3抗体  Anti-Ube2L3

原钙粘蛋白γB2抗体  Anti-PCDHGB2

蛋白质磷酸酶2调节亚基5D/PP2A-B56-δ抗体  Anti-PPP2R5D

染色体结构维持蛋白4抗体  Anti-SMC4

碱性磷酸酶（AP）标记的羊抗大鼠IgG H&L

人v-rel禽网状内皮细胞过多症病毒癌基因源物B(RelB)elisa检测试剂盒

细胞（UROKINASE）活性比色法定量检测试剂盒

小鼠百日咳病毒IgG抗体elisa分析检测试剂盒

大鼠肾上腺髓质细胞大鼠骨织素(Ostn)elisa检测试剂盒

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书
，了解细胞相关信息
，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题

，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后

，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况

，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用
。

8. 备注

：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿
。不是1个T25瓶传2个10cm皿。