老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用

、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞
、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养
。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后

，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性

，可用于重点观察细胞间的联系
、排列情况和相互影响
，以及局部环境的生物调节作用
。

产品名称：大鼠小肠成纤维细胞

英文名称：Rat intestinal fibroblasts

组织来源：小肠组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

小肠位于腹中
，上端接幽门与胃相通
，下端通过阑门与大肠相连。小肠与心互为表里。是食物消化吸收的主要场所，盘曲于腹腔内
，上连胃幽门，下接盲肠，全长约 5－6米
，张开有半个篮球大，分为十二指肠、空肠和回肠三部分
。其管壁外围有结缔组织，这些结缔组织由成纤维细胞构成
，对小肠起到支持和保护作用。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常小肠组织
。

2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1
、 HBV、HCV、支原体、
、酵母和。

5)细胞生长方式：长梭状细胞
，贴壁培养
。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 Delf 原代成纤维 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件
，直接影响细胞的体外培养
。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型
、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液
、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞
。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料
，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散
，形成细胞悬液
，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法
。

① 机械分散法

特点:简便
、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状
，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

细胞磷脂酶C（Phospholipase C）活性化学比色法定量检测试剂盒

HRP反应终止缓冲液

犬γ氨基丁酸(GABA)elisa检测试剂盒

大鼠10kDa干扰素γ诱导蛋白(IP10)elisa检测试剂盒

小鼠可溶性肌球蛋白重链2(sMHC-2)elisa检测试剂盒

酶标仪及生化分析仪 25ml

睾丸组织固着液（Bouin固着液）

小鼠基质金属蛋白酶23B(MMP23B)elisa检测试剂盒

大鼠肠碱性磷酸酶(ALPI)elisa检测试剂盒

内皮单核细胞激活肽2抗体 EMAP2

酶(因子II)激活肽1抗体 Thrombin Activation peptide fragment 1

FOXK1蛋白抗体 FOXK1

GTP酶IMAP家族成员1抗体 GIMAP1

胰岛素基因增强结合蛋白1抗体 Islet-1

乙酰化组蛋白H4(K16)重组兔单克隆抗体 Histone H4 (acetyl K16)

多巴胺受体D3抗体 Dopamine D3 receptor

翻译延伸因子EF-1 α2抗体 eEF1A2

突触后蛋白CRIPT抗体 CRIPT

微管蛋白γ单克隆抗体 Gamma Tubulin

RSPO2蛋白抗体 RSPO2

SH3BGR蛋白抗体 SH3BGR

8号染色体开放阅读框77抗体 C8orf77

AF594标记的网格蛋白重链抗体 Clathrin heavy chain, Alexa Fluor 594 conjugated

钾离子通道蛋白家族成员1抗体 KCNE1

精tRNA的蛋白转移酶1抗体 ATE1

小鼠白三烯E4(LTE4)elisa分析检测试剂盒

LYSMD2蛋白抗体

LYSMD2

细胞角蛋白3+12抗体

大鼠小肠成纤维细胞Cytokeratin 3+12

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁
。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用