① 組織塊培養法
組織塊培養是常用
、簡便易行和成功率較高的原代培養方法
。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中
,瓶壁可預先塗以膠原薄層
,以利於組織塊粘著於瓶壁
,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長
。
② 消化培養法
③ 懸浮細胞培養法
對於懸浮生長的細胞
,如白血病細胞
、淋巴細胞
、骨髓細胞
、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化
,可采用低速離心分離
,直接培養
,或經淋巴細胞分層液分離後接種培養
。
④器官培養
器官培養是指從供體取得器官或組織塊後
,不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養
,器官培養可保持器官組織的相對完整性
,可用於重點觀察細胞間的聯係
、排列情況和相互影響
,以及局部環境的生物調節作用
。
產品名稱
:大鼠小腸成纖維細胞
英文名稱
:Rat intestinal fibroblasts
組織來源
:小腸組織
產品規格
:5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介
:
小腸位於腹中
,上端接幽門與胃相通
,下端通過闌門與大腸相連
。小腸與心互為表裏
。是食物消化吸收的主要場所
,盤曲於腹腔內
,上連胃幽門
,下接盲腸
,全長約 5-6米
,張開有半個籃球大,分為十二指腸
、空腸和回腸三部分
。其管壁外圍有結締組織
,這些結締組織由成纖維細胞構成
,對小腸起到支持和保護作用
。
細胞特性
:
1)組織來源於實驗動物的正常小腸組織
。
2)細胞鑒定
:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性
。
3)經鑒定細胞純度高於90%
。
4)不含有 HIV-1
、 HBV
、HCV
、支原體
、
、酵母和
。
5)細胞生長方式
:長梭狀細胞
,貼壁培養
。
推薦培養基
:
老哥俱樂部推薦使用 Delf 原代成纖維 細胞 培養體係 作為體外培養的培養基
。
取材→分離→培養和維持
1
、取材
人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件
,直接影響細胞的體外培養
。
(1) 取材的基本要求
① 取材要注意新鮮和保鮮
② 應嚴格無菌
③ 防止機械損傷
④ 去除無用組織和避免幹燥
⑤ 應注意組織類型
、分化程度
、年齡等
⑥ 作好記錄
2
、分離
人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密
,不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖
,必須將現有的組織塊充分散開
,使細胞解離出來
。
(1)懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液
、羊水
、胸水或腹水的懸液材料
,的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾
。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層
,這樣可根據需要收獲目的細胞
。
(2)實體組織材料的分離方法
對於實體組織材料
,由於細胞間結合緊密
,為了使組織中的細胞充分分散
,形成細胞懸液
,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法
。
① 機械分散法
特點:簡便
、快速,但對組織機械損傷大
,而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織
。
② 消化分離法
組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)
,應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動
,使團塊膨鬆
,由塊狀變成絮狀
,此時再采用機械法
,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩
,使細胞團塊得以較充分的分散
,製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液
,接種培養後
,細胞容易貼壁生長
。
細胞磷脂酶C(Phospholipase C)活性化學比色法定量檢測試劑盒
HRP反應終止緩衝液
犬γ氨基丁酸(GABA)elisa檢測試劑盒
大鼠10kDa幹擾素γ誘導蛋白(IP10)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)elisa檢測試劑盒
酶標儀及生化分析儀 25ml
睾丸組織固著液(Bouin固著液)
小鼠基質金屬蛋白酶23B(MMP23B)elisa檢測試劑盒
大鼠腸堿性磷酸酶(ALPI)elisa檢測試劑盒
內皮單核細胞激活肽2抗體 EMAP2
酶(因子II)激活肽1抗體 Thrombin Activation peptide fragment 1
FOXK1蛋白抗體 FOXK1
GTP酶IMAP家族成員1抗體 GIMAP1
胰島素基因增強結合蛋白1抗體 Islet-1
乙酰化組蛋白H4(K16)重組兔單克隆抗體 Histone H4 (acetyl K16)
多巴胺受體D3抗體 Dopamine D3 receptor
翻譯延伸因子EF-1 α2抗體 eEF1A2
突觸後蛋白CRIPT抗體 CRIPT
微管蛋白γ單克隆抗體 Gamma Tubulin
RSPO2蛋白抗體 RSPO2
SH3BGR蛋白抗體 SH3BGR
8號染色體開放閱讀框77抗體 C8orf77
AF594標記的網格蛋白重鏈抗體 Clathrin heavy chain, Alexa Fluor 594 conjugated
鉀離子通道蛋白家族成員1抗體 KCNE1
精tRNA的蛋白轉移酶1抗體 ATE1
小鼠白三烯E4(LTE4)elisa分析檢測試劑盒
LYSMD2蛋白抗體
LYSMD2
細胞角蛋白3+12抗體
大鼠小腸成纖維細胞Cytokeratin 3+12
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行
。
1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月
。
T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁
。
本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的,不可用於人類或動物的臨床診斷或治療
,非藥用
,非食用