老哥俱乐部

细胞简介
：

雪旺细胞沿神经元的突起分布
，包裹在神经纤维上
，雪旺细胞的外表面有基膜，能分泌神经营养因子，促进受损的神经元的存活及其轴突的再生，参与周围神经系统中神经纤维的构成。研究表明，神经元延伸时对与其接触的底物是非常具有选择性的，而且一旦与雪旺细胞接触，神经纤维的延伸就会严格限制在 Bungner带内

。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物的正常脑组织。

2)细胞鉴定
：GFAP荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%

。

4)不含有 HIV-1

、 HBV、HCV

、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式
：长梭形细胞，不规则细胞

，贴壁培养
。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 Delf原代 雪旺 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养
：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4


、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬

，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次

，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min
；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次

，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照

。

公司正在出售的产品：

体液亚硝酸盐含量荧光定量检测试剂盒

KIAA1586蛋白抗体

KIAA1586

染色质解旋酶DNA结合蛋白3抗体

CHD3

原儿茶醛含量测试盒

胱硫醚-γ-合成酶（cystathionine γ-synthase；CGS）活性比色法定量检测试剂盒

小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)elisa检测试剂盒

大鼠凋亡诱导因子(AIF)elisa分析检测试剂盒

NBPF3蛋白抗体

NBPF3

FMR1NB蛋白抗体

FMR1NB

四分子交联体6抗体（四旋蛋白）  Anti-TSPAN6

α型-过氧化酶活化受体抗体（PPAR α, PPAR-α）  Anti-PPAR alpha

氧气调节蛋白150抗体  Anti-ORP150

磷酸化血清应答因子抗体  Anti-Phospho-SRF (Ser103)

磷酸化T细胞活化连接蛋白抗体

Phospho-LAT (Tyr191)

神经细胞正五聚蛋白受体抗体

NPTXR

嗜铬颗粒胺转运蛋白VAT1抗体  Anti-VMAT1/VAT1

肌痉挛性癫痫病相关EPM2蛋白抗体  Anti-NHLRC1/EPM2A

G蛋白家族RAB21蛋白抗体  Anti-RAB21

跨膜蛋白超家族9-1抗体  Anti-TM9SF1

大鼠成纤维细胞生长因子13(FGF-13)elisa分析检测试剂盒

猴促肾上皮质释放(CRH)elisa生化检测试剂盒

CRH ELISA kit

人二磷酸腺苷(ADP)elisa生化检测试剂盒

大鼠雪旺细胞ADPELISAkit

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基
、血清比例、所需细胞因子等

，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象
。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h

。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞
，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系
，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿

。不是1个T25瓶传2个10cm皿。