老哥俱乐部

细胞简介：

颌下腺属于唾液腺的一种，主要的功能就是分泌唾液（一般称为口水）。颌下腺发生病变是会引起颌下腺肿大。一般是腺体内有涎石引起继发的感染。 ·

细胞特性：

1）细胞来源于人颌下腺囊肿组织。

2)不含有 HIV-1
、 HBV
、HCV、支原体、

、酵母和。

3)细胞生长方式：不规则细胞，贴壁培养
。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 Delf原代肿瘤细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小
；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s，置37℃条件下消化10min


，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时
，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min
，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后

，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养

。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 
。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

MCP-5ELISAKit

鲑鱼促胰液素/胰泌素(SCT)elisa分析检测试剂盒

SCT ELISA kit

HumanCETPELISAKit

神经突触相关蛋白SLITRK2抗体  Anti-SLITRK2

环指蛋白36抗体  Anti-RNF36

尼曼匹克C2前体蛋白抗体  Anti-NPC2/Niemann Pick C2

锌结合乙醇脱氢酶结构域蛋白1抗体  Anti-ZADH1

钾离子通道蛋白15抗体

KCNK15

Rho鸟甘酸转运蛋白抗体

ARHGEF11

蛋白质羰基测试盒测血清
、组织 100管/50样 50管/25样 紫外比色法

（含HRP二抗）

小鼠次级组织趋化因子6Ckine(CCL21)elisa检测试剂盒

大鼠FMS样激酶3(Flt3)elisa检测试剂盒

环指蛋白187抗体

RNF187

CGG结合蛋白1抗体

CGGBP1

线粒体二羧酸载体蛋白11抗体  Anti-SLC25A11

胞质分裂调控蛋白1抗体  Anti-PRC1

原钙粘蛋白γA9抗体  Anti-PCDHGA9

泛素蛋白连接酶D1抗体  Anti-UBE2D1

胶体金标记的兔抗人IgM

JAK和微管相互作用蛋白2/JAK和微管相互作用蛋白2抗体

JAKMIP2

神经元电压门控钙通道γ6抗体

人颌下腺囊肿细胞CACNG6