老哥俱乐部

① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层
，以利于组织块粘着于瓶壁

，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞
、淋巴细胞、骨髓细胞
、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离
，直接培养
，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后
，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养
，器官培养可保持器官组织的相对完整性
，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：人脉络膜成纤维细胞

英文名称：Human primary choroidal fibroblasts cells

组织来源
：眼组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

脉络膜新生血管 (choroidal neovascularization，CNV)已成为眼科学领域的研究热点之一，在血管外侧有结缔组织，结缔组织是由成纤维细胞构成，起到支持和保护作用。

细胞特性

：

1）组织来源于人的正常眼组织
。

2)细胞鉴定
：波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性
。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和

。

5)细胞生长方式：长梭形细胞
，不规则细胞，贴壁培养
。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 delf 原代成纤维细胞培养体系 作为体外培养的培养基

。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型


、分化程度
、年龄等

⑥ 作好记录

2
、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密
，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖
，必须将现有的组织块充分散开

，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水
、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层
，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大
，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织
。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)
，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动
，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液
，接种培养后，细胞容易贴壁生长
。

大鼠果糖二0酸缩酶A(ALDOA)检测试剂盒 ，英文名： ALDOA ELISA Kit

Rat apoptosis inducing protein BH3 domain (Bid) ELISA Kit 大鼠BH3结构域凋亡诱导蛋白(Bid)检测试剂盒

RatToll-likereceptor4,TLR4ELISAKit 大鼠Toll样受体4(TLR4)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforENA-78/CXCL5(HumanEpithelialneuophilactivatingpeptide78)ELISAKit人上皮粒细胞活化肽78

细胞镁离子浓度化学比色法定量检测试剂盒20次

RatLactoferrin,LTF/LFELISAKit大鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)检测试剂盒

CSF3重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein

血管内皮生长因子D(VEGFD)重组蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)

HA重组甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

ADAM12 Protein Human 重组人 ADAM12 蛋白 (His 标签)

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168)

血管内皮生长因子D(VEGFD)重组蛋白 Recombinant Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD)

ADAM12 Protein Human 重组人 ADAM12 蛋白 (His 标签)

CSF3重组人 G-CSF / CSF3 蛋白 (isoform b) Protein

GP140 Protein HIV 重组人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group P, strain RBF168)

HA重组甲型流感 H3N2 (A/Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

植物D3(VD3)ELISA 试剂盒

Human ai liver cytosolaibody type 1 (LC1) ELISA Kit 人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)检测试剂盒

Porcinegrowthhormone,GHELISAKit 猪生长激素(GH)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP-L1ELISAKit小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1

血液E高效液相色谱法定量检测试剂盒20次

Mousethrombospondin1,TSP-1ELISAKit小鼠血小板反应蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)检测试剂盒

人脉络膜成纤维细胞植物RNA提取试剂盒(溶液法）   24ml

PlanNAplus   40ml

质粒大量提取试剂盒   5T

PlasmidMaxiKit   10T

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月
。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用