老哥俱乐部

细胞简介：

神经元
，又称神经细胞，是构成神经系统结构和功能的基本单位
。神经元是具有长突触（轴突）的细胞
，它由细胞体和细胞突起构成
。在长的轴突上套有一层鞘
，组成神经纤维，它的末端的细小分支叫做神经末梢。细胞体位于脑、脊髓和神经节中，细胞突起可延伸至全身各器官和组织中。

细胞特性
：

1）组织来源于人的正常脑组织
。

2)细胞鉴定：NSE荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%

。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体
、、酵母和
。

5)细胞生长方式
：不规则细胞
，贴壁培养。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 Delf原代 神经元 细胞培养体系 作为体外培养的培养基
。

实验报告

：

一
、分离与培养：

1
、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4
、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清


，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 
，5％CO2 培养箱中培养
；

5
、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基
，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3
、PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次

，每次10min，按1

：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次，每次10min
，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

DAB2IPELISAkit

组蛋白H2A BBD抗体

Histone H2A-Bbd

5-羟色胺受体3D抗体

5HT3D Receptor

人肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)elisa检测试剂盒

酵母化学感受态细胞直接转化试剂盒

鱼磷酸烯醇丙酮酸羧激酶,细胞质基质[GTP](PCK1)elisa分析检测试剂盒

大鼠双肾上腺皮质(DCX)elisa检测试剂盒

LYPD6B蛋白抗体

LYPD6B/CT116

11号染色体开放阅读框71抗体

C11orf71

跨膜蛋白SEMA3D抗体  Anti-Semaphorin 3D/SEMA3D

磷酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体  Anti-phospho-RUNX1/AML1(Ser249)

蛋白激酶C结合蛋白NELL2抗体  Anti-NELL2/NRP2

原癌基因蛋白激酶Yes1抗体  Anti-YES1

信号转导和转录激活因子5b重组兔单克隆抗体

STAT5b

癌/睾丸抗原105抗体

CT105

S期激酶相关蛋白1抗体  Anti-SKP1

果糖-2,6-二磷酸酶心肌酶抗体  Anti-PFKFB2

磷酸酯酶-2Ac抗体  Anti-PP2Ac/PP4C

生精细胞凋亡相关基因6抗体  Anti-TSARG6/DNAJB13

Alexa Fluor 750标记大鼠IgG（型对照)

羊环磷酸鸟苷(cGMP)elisa生化检测试剂盒

cGMP ELISA Kit

人包虫抗体IgG elisa生化检测试剂盒

人脑皮层神经元细胞HumanechinococcusantibodyIgGELISAKit

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液
、浑浊等现象
，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基

、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题

，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片
，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决

。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。