老哥俱乐部

细胞简介：

皮脂腺癌是一种少见的恶性肿瘤
，常发生于眼睑、面部、头皮等处的皮脂腺

。有分化差、渗透性生长方式和脉管侵犯等特点
。和其它肿瘤一样，皮脂腺的发展通过 3种方式：局部浸润、多灶性以及肿瘤细胞脱落。

此外，皮脂腺癌还能通过管
、血管侵犯导致远处转移。目前，手术切除是皮脂腺癌的主要方式。

细胞特性
：

1）细胞来源于术后人的皮脂腺癌组织
。

2）细胞鉴定
：广谱角蛋白((Pan Cytokeratin)荧光染色为阳性

。

3）经鉴定细胞纯度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和
。

5）细胞生长方式：梭形细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

老哥俱乐部推荐使用 delf原代 肿瘤 细胞培养体系 作为该细胞的培养基
。

实验报告：

一

、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小

；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s
，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3

、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4

、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min
，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ 

，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后
，吸出培养基
，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二
、免疫荧光鉴定：

1
、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次
，每次10min
，按1
：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h
；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品
：

小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 试剂盒

Rat apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 大鼠凋亡诱导因子(AIF)检测试剂盒

Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitfor(MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199)ELISAKit小鼠胃肠癌标志物CA199

饮料乙酸激酶法定量检测试剂盒20次

MouseIerleukin6,IL-6ELISAKit小鼠白介素6(IL-6)检测试剂盒

CD164重组大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白  Protein

ER-Alpha peptide 雌激素受体(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受体(多肽抗原)

PRSS27重组人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 标签) Protein

ADAM15 Protein Human 重组人 ADAM15 蛋白 (His 标签)

ADIPOQ Protein Mouse 重组小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 标签)

ER-Alpha peptide 雌激素受体(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受体(多肽抗原)

ADAM15 Protein Human 重组人 ADAM15 蛋白 (His 标签)

CD164重组大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白  Protein

ADIPOQ Protein Mouse 重组小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 标签)

PRSS27重组人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 标签) Protein

植物E(VE)ELISA 试剂盒

Human liver specific lipoprotein aibody (LSP) ELISA Kit 人抗肝特异性脂蛋白抗体(LSP)检测试剂盒

PorcineCoicosterone,COELISAKit 猪皮质酮/肾上腺酮(CO)检测试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP-L1(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1)ELISAKit人小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体1

血液D比色法定量检测试剂盒20次

MouseThromboxaneB2,TXB2ELISAKit小鼠血栓素B2(TXB2)检测试剂盒

人皮脂腺癌细胞植物草酸氧化酶(OxO)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物25羟基D3(25(OH)D3/25HVD3)检测试剂盒     试剂盒   组装/原装

鱼脱酶3（DIO3）ELISA检测试剂盒     ELISA   组装/原装

鱼脱酶2（DIO2）ELISA检测试剂盒     ELISA   组装/原装

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系
。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题
，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面
，显微镜下观察细胞状态。因运输问题
，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h
。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min
，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，
，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。