老哥俱乐部

细胞简介
：

产品规格： >5×10 5 细胞数

包装规格： T-25培养瓶

细胞 详述 ：

神经胶质细胞广泛分布于神经系统内，是除了神经元以外的所有细胞
，在神经系统中数量大约是神经元的十倍。具有支持、滋养神经元的作用。

胶质细胞与神经元一样也具有细胞凸起，但其胞质凸起不分树突和轴突
。

星形胶质细胞，是胶质细胞中体积大的一种。从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。

细胞特性
：

1） 组织来源于人的正常脑组织
。

2) 细胞 鉴定
：神经胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)荧光染色法 。

3) 经鉴定细胞纯度高于 90 %

。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV
、支原体、、酵母和
。

5) 细胞生长方式：梭形细胞，贴壁培养。

推荐培养基
：

老哥俱乐部推荐使用 原代星型胶质细胞培养体系 作为体外培养原代神经胶质细胞的培养基
。

实验报告
：

一
、分离与培养
：

1、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织
，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2
、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶）
，混悬10s

，置37℃条件下消化10min

，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清
，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置
，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬
，接种于25cm2培养瓶
，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次
，每次10min
，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min
；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下
，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后在室温条件下
，用4% BSA封闭细胞30min
；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min

，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照
。

公司正在出售的产品：

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：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：植物E试剂盒、植物E 检测试剂盒   保存条件
：2-8℃   保质期：6个月
。

豚鼠肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒   豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒
，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名
：豚鼠肠脂肪酸结合蛋白试剂盒、豚鼠肠脂肪酸结合蛋白检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月
。

人chemerin检测试剂盒   人chemerin试剂盒   规格型号：96T/48T   人chemerin试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：检测试剂盒（进口分装）
，产品别名
：人chemerin试剂盒
、人chemerin 检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

人12羟二十烷四烯酸检测试剂盒   人12羟二十烷四烯酸试剂盒   规格型号
：96T/48T   人12羟二十烷四烯酸试剂盒
，规格型号：96T/48T
，来源：检测试剂盒（进口分装），产品别名：人12羟二十烷四烯酸试剂盒、人12羟二十烷四烯酸检测试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好
，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系

。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息
，如细胞形态、所用培养基、血清比例
、所需细胞因子等
，确保细胞培养条件一致

，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清


。加5 mL PBS重悬细胞
，再900 rpm-1000 rpm离心3 min
，，用新鲜的*培养基重悬细胞
，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养
。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片

，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流
。由于运输的原因
，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注
：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞

，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞

。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。