細胞簡介 ：

輸卵管位於人體的盆腔內 ，一般的人有兩條 ，左 、右輸卵管各位於一側 。它們由底外側角部向外 ，平行伸展 ，先達卵巢的端 ，再沿卵巢係膜緣上行至卵巢的輸卵管端 ，且呈弓形而覆蓋於卵巢上 ，然後向下 、向內行 ，終止於卵巢的遊離緣及其內側麵上部 。

粘膜層的上皮為單層高柱狀細胞所構成 ，上皮細胞可分為 4種不同類型 ：纖毛細胞 、分泌細胞 、楔形細胞和未分化細胞 。輸卵管是卵子運輸 、儲存 、獲能 ，以及卵母細胞采取 、運送 、成熟 、受精和早期胚胎發育的重要場所 。輸卵管上皮細胞體外培養可以用於飼養層細胞 ，與胚胎共培養 ，克服胚胎的發育阻滯現象。

因此 ，體外培養輸卵管上皮細胞 ，不但可以進一步了解影響生殖微環境變化的因素 ，而且還可以建立輸卵管上皮細胞與胚胎共培養體係 ，研究輸卵管上皮細胞對胚胎體外發育的影響 。

細胞特性 ：

1）細胞來源於人正常輸卵管組織 。

2)細胞鑒定 ：細胞角蛋白-17（CK-17）熒光染色為陽性 。

3)經鑒定細胞純度高於90% 。

4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5)細胞生長方式 ：上皮樣 ，多角形細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 Delf原代上皮細胞培養體係 作為體外培養的培養基 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃ ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠無翅型MMTV整合位點家族成員5A(W5A)檢測試劑盒  ，英文名 ： W5A ELISA Kit

Mouse eosinophil chemotactic protein Eotaxin 1 (Eotaxin 1/CCL11) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)檢測試劑盒

MouseCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 小鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)檢測試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHSP-20ELISAKit大鼠熱休克蛋白20

細胞MSK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitIL-12/P40大鼠白介素12

AGRP重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標簽) Protein

Adropin蛋白(AD)重組蛋白 Recombinant Adropin (AD)

CCDC47重組人 CCDC47 蛋白 (His 標簽) Protein

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)

TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

Adropin蛋白(AD)重組蛋白 Recombinant Adropin (AD)

FGF21 Protein Human 重組人 FGF21 蛋白 (His 標簽)

AGRP重組小鼠 AGRP / AgRP 蛋白 (His 標簽) Protein

TNF Protein Rat 重組大鼠 TNF-alpha / TNFA 蛋白

CCDC47重組人 CCDC47 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA 試劑盒

Rat thrombin aithrombin complex (TAT) ELISA Kit 大鼠抗複合物(TAT)檢測試劑盒

HumanBigEndothelin,BigETELISAKit 人大內皮素(BigET)檢測試劑盒 進口分裝

HumanATP-bindingcassetteanspoerG2,ABCG2檢測試劑盒人腺苷三0酸結合盒轉運體G2(ABCG2)檢測試劑盒

植物源性食品腰果(cashew)試劑盒20次

HumahromboxaneA2,TX-A2ELISAKit人血栓素A2(TX-A2)檢測試劑盒

人輸卵管上皮細胞C（VC）檢測   Vitamin B2 (VB2) detection

B1（VB1）檢測   The total amino acid (TAA) detection

B2（VB2）檢測   Detection of malic dehydrogenase

總基酸（T－AA）檢測   Hydroxyproline sample preeatme

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。