產品名稱 :人胃平滑肌細胞
產品特點 :人胃平滑肌細胞公司正在出售的產品人胚肺成纖維細胞;MRC-5 人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1 AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 杆狀病毒-昆蟲細胞裂解液 ASGR2 Others Human 人 ASGR2 人細胞裂解液 人淋巴內皮細胞 (HLEC)
產品型號 :
更新日期:2024-12-19
訪問次數 :521
人胃平滑肌細胞的詳細資料 :
細胞簡介 :
胃是人體的消化器官 ,位於膈下 ,胃壁由黏膜 、黏膜下層 、肌層和外膜四層組成 ,並有神經 、血管和管的分布 。其中平滑肌主要位於肌層中 ,胃的肌層發達 ,由內斜 、中環和外縱三層平滑肌構成 。其中 ,中層環形平滑肌在幽門處增厚 ,形成幽門括約肌 ,具有節製胃內容物排出的作用。
胃動力性的發生與平滑肌的收縮性的改變密切相關 ,現已有充分證據說明, Cajal間質細胞是胃部運動的起搏細胞 ,它存在於環形肌與縱行肌之間 ,並緊靠肌間神經叢 ;同時Ca2+在平滑肌的收縮中起著重要的信使作用 ,這些都是胃動力性研究中的重要方向 。
產品名稱 | 人胃平滑肌細胞 | 組織來源 | 胃組織 |
英文名稱 | Primary human gastric smooth muscle cells | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 |
細胞特性
:
1) 細胞來源於人正常胃組織 。
2) 細胞鑒定 :平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性 。
3) 經鑒定細胞純度高於90% 。
4) 不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。
5) 細胞生長方式 :長梭狀細胞 ,貼壁培養 。
推薦培養基
:
老哥俱樂部推薦使用 Delf原代平滑肌細胞培養體係 作為體外培養的培養基
。
實驗報告
:
一
、分離與培養
:
1 、無菌條件下 ,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ,然後用PBS將此組織塊清洗2次 ,將組織剪成1mm3左右大小 ;
2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶) ,混懸10s ,置37℃條件下消化10min ,之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ,自然沉澱並收集上清 ,用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ;
3 、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液 ,混懸10s ,置37℃消化10 min後 ,按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ,重複此步驟2-3次 ,直至組織被消化 ;
4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ,1200r/min 離心10min ,棄去上清 ,沉澱細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸 ,接種於25cm2培養瓶 ,放置於37℃ ,5%CO2 培養箱中培養 ;
5 、差速貼壁1h後 ,吸出培養基 ,按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ;二 、免疫熒光鑒定 :
1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ,棄去培養基 ,用溫育的PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ;
2 、PBS衝洗細胞2次 ,每次10min ,然後在4℃條件下 ,用0.1%Triton X-100透膜15min ;
3 、PBS衝洗細胞2次,每次10min ,然後在室溫條件下 ,用4% BSA封閉細胞30min ;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ,然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ;
5 、PBS衝洗細胞3次 ,每次10min ,按1 :150的比例稀釋抗α-actin的二抗 , 37℃條件下放置1h;
6
、用PBS衝洗3次
,每次10min
,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照
。
注意事項
:
1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好
,培養液是否有漏液
、渾濁等現象
,若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係
。
2. 仔細閱讀細胞說明書 ,了解細胞相關信息 ,如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ,確保細胞培養條件一致 ,若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ,責任由客戶自行承擔 。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ,顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ,部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ,是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。
4. 貼壁細胞可以消化 ,懸浮細胞直接混勻收集細胞 ,900 rpm-1000 rpm離心3 min ,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞 ,再900 rpm-1000 rpm離心3 min , ,用新鮮的*培養基重懸細胞 ,並接種到新的培養瓶或培養皿中 ,置於培養箱中進行培養 。
5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。
6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ,記錄細胞狀態 ,便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ,個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ,請及時和老哥俱樂部聯係 ,告知細胞的具體情況 ,以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。
7. 該細胞僅供科研使用 。
8. 備注 :運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ,請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 :2傳代 。
9.注意 : 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。
公司正在出售的產品
:
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