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基質金屬蛋白酶1酶原ELIS檢測試劑盒

產品名稱 :基質金屬蛋白酶1酶原ELIS檢測試劑盒

產品特點 :基質金屬蛋白酶1酶原ELIS檢測試劑盒相關名稱 :涇陽鏈黴菌 Streptomyces jingyangensis吸水鏈黴菌紫色變種 Streptomyces hygroscopicus var. violaceus

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產品型號 :48T/96T

更新日期 :2021-04-16

訪問次數 :360

48T/96T基質金屬蛋白酶1酶原ELIS檢測試劑盒的詳細資料 :

產品名稱 :基質金屬蛋白酶1酶原ELIS檢測試劑盒
英文名稱:Pro-Matrix Metalloproteinase 1
產品貨號 :EY-E97647
產品規格:48T/96T
產品保存 :2-8℃ ,有效期6個月
主要組成成分 :試劑 
    性狀 :液體 
    產品規格 :96T/48T 
    96T指可以做94個標本 ,2個標準對照 
    48T指可以做47個標本 ,1個標準對照 
    96T-84個樣本 
    48T-42個樣本 
    待檢樣本 :體液 ,血清 ,血漿 ,細胞培養上清液 ,尿液 ,組織勻漿,心房水標本等等 。 

樣品收集 、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激 。使用不含熱原和內毒素的試管 。收集血液後 ,1000×g離心10分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離 。
2)血漿-----EDTA 、檸檬酸鹽 、肝素血漿可用於檢測 。1000×g離心30分鍾去除顆粒 。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鍾去除顆粒和聚合物 。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎 。1000×g離心10分鍾,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用 ,應將其分成小部分-70 ℃保存 ,避免反複冷凍 。盡可能的不要使用溶血或高血脂血 。如果血清中大量顆粒 ,檢測前先離心或過濾 。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍 。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍 。
注意事項
1)試劑應按標簽說明書儲存 ,使用前恢複到室溫 。稀稀過後的標準品應丟棄 ,不可保存 。
2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存 ,以免變質 。
3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好 。不同批號的試劑不要混用 。保質前使用 。
4)使用一次性的吸頭以免交叉汙染 ,吸取終止液和底物A 、B液時 ,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
5)使用幹淨的塑料容器配置洗滌液 。使用前充分混勻試劑盒裏的各種成份及樣品 。
6)洗滌酶標板時應充分拍幹 ,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水 。
7)底物A應揮發 ,避免長時間打開蓋子 。底物B對光敏感 ,避免長時間暴露於光下 。避免用手接觸 ,有毒 。實驗完成後應立即讀取OD值 。
8)加入試劑的順序應一致 ,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣 。
9)按照說明書中標明的時間 、加液的量及順序進行溫育操作 。

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ELISA 試驗時 ,注意事項如下 : 
     1. 正式試驗時 ,應分別以陽性對照與陰性對照控製試驗條件 ,待檢樣品應作一式二份 ,以保證實驗結果的準確性 。有時本底較高 ,說明有非特異性反應 ,可采用羊血清 、兔血清或BSA等封閉 。 
     2. 在ELISA中 ,進行各項實驗條件的選擇是很重要的 ,其中包括: 
     (1) 固相載體的選擇 :許多物質可作為固相載體 ,如聚氯乙烯 、聚苯乙烯 、聚丙酰胺和纖維素等 。其形式可以是凹孔平板 、試管 、珠粒等 。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板 。不管何種載體 ,在使用前均可進行篩選 :用等量抗原包被 ,在同一實驗條件下進行反應 ,觀察其顯色反應是否均一性 ,據此判明其吸附性能是否良好 。 
     (2) 包被抗體(或抗原)的選擇 :將抗體(或抗原)吸附在固相載體表麵時 ,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間 。吸附溫度 ,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時 。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定 :即用不同的蛋白質濃度(0.1 、1.0和10μg/ml等)進行包被後 ,在其它試驗條件相同時 ,觀察陽性標本的OD值 。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度 。對於多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml 。 
     (3) 酶標記抗體工作濃度的選擇 :首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份) 。然後再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物 、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗係統裏準確地滴定其工作濃度 。 
     (4) 酶的底物及供氫體的選擇 :對供氫體的選擇要求是價廉 、安全 、有明顯地顯色反應 ,而本身無色 。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用 ,應注意防護 。有條件者應使用不致癌 、靈敏度高的供氫體 ,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體 。底物作用一段時間後 ,應加入強酸或強堿以終止反應 。通常底物作用時間 ,以10-30分鍾為宜。底物使用液必須新鮮配製 ,尤其是H2O2在臨用前加入  。

 

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