細胞簡介 ：

甲狀腺是人體大的腺 。棕紅色 ，分左右兩葉 ，中間相連 ，呈 H形 。甲狀腺濾泡是甲狀腺的基本結構單位 ，濾泡外周是一層排列整齊的上皮細胞 ，甲狀腺上皮細胞是甲狀腺合成和釋放的部位 ，濾泡腔內充滿均勻的膠性物質 ，是甲狀腺複合物 ，也是甲狀腺的貯存庫 。同時 ，上皮細胞具有強大的吸收碘化物的能力 。甲狀腺體活動減弱時 ，上皮細胞呈扁平狀 。

細胞特性 ：

1）組織來源於實驗動物的正常甲狀腺組織 。

2)細胞鑒定 ：甲狀腺球蛋白（Tg）熒光染色為陽性 。

3)經鑒定細胞純度高於90% 。

4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5)細胞生長方式 ：鋪路石狀細胞 ，不規則細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 Delf原代上皮細胞培養體係 作為體外培養的培養基 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清 ，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液 ，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4 、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜 ；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液 、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清 。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況 ，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代 。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。

公司正在出售的產品 ：

大鼠β位澱粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)elisa檢測試劑盒

果菜（folic acid）含量比色法定量檢測試劑盒

小鼠Tau蛋白elisa分析檢測試劑盒

大鼠胰島素樣生長因子結合蛋白2(IGFBP2)elisa檢測試劑盒

HISTONE H3蛋白表達西方雜交分析試劑盒

石蠟切片黑色素去色試劑盒

人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)elisa分析檢測試劑盒

大鼠Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)elisa檢測試劑盒

小鼠磷酸酶張力蛋白源物(PTEN)elisa檢測試劑盒

APC標記小鼠CD107a單克隆抗體 mouse CD107a/APC

B7H6蛋白抗體 B7-H6

跨膜蛋白132A抗體 TMEM132A

蛋白激酶NKF3抗體 NKF3 kinase family member

X染色體開放閱讀框26抗體 CXorf26

β澱粉樣蛋白前體蛋白結合蛋白2抗體 APPBP2

細胞毒顆粒相關蛋白TIA-1抗體 TIA1

細胞角蛋白85抗體 KRT85

Kelch樣蛋白15抗體 KLHL15

LENG9蛋白抗體 LENG9

驅動蛋白家族蛋白7抗體 KIF7

熱休克蛋白75抗體 TRAP1/HSP75

甘胺酸-N-酰基轉移酶抗體 GLYAT

幹擾素誘導的三角形四肽重複蛋白1B抗體 IFIT1B

早老素蛋白-1抗體 presenilin 1

中心體蛋白110抗體 CP110

動物結組織細胞分離培養試劑盒

大鼠Ⅰ型前膠原(PCⅠ)elisa生化檢測試劑盒

PC I ELISA Kit

人富組糖蛋白(HRG)elisa生化檢測試劑盒

兔甲狀腺上皮細胞HRGELISAkit