細胞簡介 ：

乳腺導管位於胸部的皮下組織中 ，是的主要構成組織之一 ，也是乳汁的排泄管道 。乳腺管的主要功能是乳汁的排泄和儲存每個乳腺葉都有一個輸乳管 ，輸乳管會在近處形成膨大的輸入管竇 ，末端變細並開口於 。

乳腺被結締組織分隔為 15-25個 葉 ，每個葉又分為若幹小葉 ，每個小葉是一個複管泡狀腺 。腺泡上皮為單層立方或柱狀 ，導管包括小葉內導管 、上間導管和總導管 。小葉內導管多為單層柱狀或立方上皮 ，小葉間導管為複層柱狀上皮 ，總導管又稱輸乳管 ，開口於 ，管壁為複層扁平上皮 ，下表皮相續 。

細胞特性 ：

1）細胞來源於實驗動物正常乳腺組織 。

2)細胞鑒定 ：細胞角蛋白（PCK）熒光染色為陽性 。

3)經鑒定細胞純度高於90% 。

4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5)細胞生長方式 ：上皮樣 ，多角形細胞 ，貼壁培養 。

推薦培養基 ：

老哥俱樂部推薦使用 DELF 原代 上皮 細 胞培養體係 作為體外培養的培養基 。

實驗報告 ：

一 、分離與培養 ：

1 、無菌條件下 ，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織 ，然後用PBS將此組織塊清洗2次 ，將組織剪成1mm3左右大小 ；

2 、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶） ，混懸10s ，置37℃條件下消化10min ，之後用滴管吹打製成單細胞懸液 ，自然沉澱並收集上清，用含10% FBS培養基終止消化後4℃放置 ；

3 、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s ，置37℃消化10 min後 ，按上述方法收集上清並終止消化後4℃放置 ，重複此步驟2-3次 ，直至組織被消化 ；

4、用200目不鏽鋼篩網過濾細胞消化液 ，1200r/min 離心10min ，棄去上清 ，沉澱細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸 ，接種於25cm2培養瓶 ，放置於37℃  ，5％CO2 培養箱中培養 ；

5 、差速貼壁1h後 ，吸出培養基 ，按實驗需要接種於6孔板中繼續培養 ；二 、免疫熒光鑒定 ：

1 、待心房肌細胞生長至80%融合時 ，棄去培養基 ，用溫育的PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min ；

2 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在4℃條件下 ，用0.1％Triton X-100透膜15min ；

3 、PBS衝洗細胞2次 ，每次10min ，然後在室溫條件下 ，用4% BSA封閉細胞30min ；

4 、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗 ，然後將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5 、PBS衝洗細胞3次 ，每次10min ，按1 ：150的比例稀釋抗α-actin的二抗 ， 37℃條件下放置1h ；

6 、用PBS衝洗3次 ，每次10min ，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像並拍照 。

注意事項 ：

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是否完好 ，培養液是否有漏液、渾濁等現象 ，若有上述現象發生請及時和老哥俱樂部聯係 。

2. 仔細閱讀細胞說明書 ，了解細胞相關信息 ，如細胞形態 、所用培養基 、血清比例 、所需細胞因子等 ，確保細胞培養條件一致 ，若由於培養條件不一致而導致細胞出現問題 ，責任由客戶自行承擔 。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表麵 ，顯微鏡下觀察細胞狀態 。因運輸問題 ，部分細胞由於溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片 ，是正常現象 。觀察好細胞狀態後 ，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置於37℃培養箱放置4-6h 。

4. 貼壁細胞可以消化 ，懸浮細胞直接混勻收集細胞 ，900 rpm-1000 rpm離心3 min ，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞 ，再900 rpm-1000 rpm離心3 min ， ，用新鮮的*培養基重懸細胞 ，並接種到新的培養瓶或培養皿中 ，置於培養箱中進行培養 。

5. 請客戶用相同條件的培養基用於細胞培養 。

6. 建議客戶收到細胞後前3天各拍幾張細胞照片 ，記錄細胞狀態 ，便於和我司技術部溝通交流 。由於運輸的原因 ，個別敏感細胞會出現不穩定的情況 ，請及時和老哥俱樂部聯係 ，告知細胞的具體情況，以便老哥俱樂部的技術人員跟蹤回訪直至問題解決 。

7. 該細胞僅供科研使用 。

8. 備注 ：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞 ，請換用按照說明書細胞培養條件新配製的*培養基來培養細胞 。收到細胞後次傳代建議1 ：2傳代  。

9.注意 ： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿 。不是1個T25瓶傳2個10cm皿 。

公司正在出售的產品 ：

細胞AURORA-A激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

細胞GSK-3BETA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒

澱粉分支酶（SBE）測試盒

胞漿微型RNA（miRNA）超濾法分離試劑盒

小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa檢測試劑盒

細胞C-MET激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）

人Podocin elisa分析檢測試劑盒

大鼠β-防禦素(β-Defensins)elisa檢測試劑盒

小鼠生長(GH)elisa檢測試劑盒

乙酰化化組蛋白H2B (Lys15)鼠單克隆抗體 Histone H2B (Acetyl K16)

尤文氏肉瘤相關EWS蛋白抗體 EWSR1

二肽氨基肽酶3抗體 DPP3

防禦素β1/Defensin β1抗體 Defensin beta 1

Grp94相鄰核苷酸酶抗體 NT5DC3

G蛋白偶聯受體21抗體 GPR21

囊泡轉運蛋白SFT2C抗體 SFT2C

內質網脂質轉運相關蛋白2抗體 SPFH2

AF488標記的抗小鼠Ly-6G/Ly-6C單克隆抗體 mouse Ly-6G/Ly-6C, Alexa Fluor 488 conjugated

AF680標記的脂聯素受體1抗體 Adiponectin Receptor 1, Alexa Fluor 680 conjugated

膠原三股螺旋重複蛋白1抗體 CTHRC1

精酶2抗體 Arginase II

SETD6蛋白抗體 SETD6

SYCE1蛋白抗體 SYCE1

源盒蛋白HOXA9抗體 HOXA9

味覺感受器蛋白T2R6抗體 T2R6

小鼠CD4分子(CD4)elisa檢測試劑盒

大鼠脯羥化酶(PHD)elisa生化檢測試劑盒

PHD ELISA Kit

豚鼠白介素18(IL-18)elisa生化檢測試劑盒

兔乳腺導管上皮細胞IL-18ELISAKit