① 組織塊培養法

組織塊培養是常用 、簡便易行和成功率較高的原代培養方法 。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種於培養瓶(或皿)中 ，瓶壁可預先塗以膠原薄層 ，以利於組織塊粘著於瓶壁 ，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長 。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對於懸浮生長的細胞 ，如白血病細胞 、淋巴細胞 、骨髓細胞 、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化 ，可采用低速離心分離 ，直接培養 ，或經淋巴細胞分層液分離後接種培養 。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊後 ，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養 ，器官培養可保持器官組織的相對完整性 ，可用於重點觀察細胞間的聯係 、排列情況和相互影響 ，以及局部環境的生物調節作用 。

產品名稱 ：兔腎足細胞

英文名稱 ：Rabbit primary renal podocytes

組織來源 ：腎髒組織

產品規格 ：5×105cells/T25細胞培養瓶

細胞簡介 ：

腎小球為血液過濾器 ，腎小球壁構成過濾膜 。腎小球過濾膜從內到外有三層結構 ：內層為內皮 、中層為腎小球基膜 、外層為上皮細胞層 ，上皮細胞又稱足細胞 ，其不規則突起稱足突 ，其間有許多狹小間隙 ，血液經濾膜過濾後 ，濾液入腎小球囊 。在正常情況下 ，血液中絕大部分蛋白質不能濾過而保留於血液中 ，僅小分子物質如尿素 、葡萄糖 、電解質及某些小分子蛋白能濾過 。

腎足細胞即腎小球上皮細胞 ，它附著於腎小球基底膜的外側 ，連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構成了腎小球血液濾過屏障 。又由於正常成年機體的腎髒足細胞是一種終末分化細胞 ，體外培養的原代細胞不能增殖 。

足細胞呈星型多突狀 ，胞體較大 ，由胞體伸出許多突起 ，呈指狀交叉覆蓋於腎小球基底膜外表麵 ，並通過黏附分子和蛋白多糖分子與腎小球基底膜相連 。

足細胞在正常情況下可以分泌腎小球基底膜的主要組成成分 IV型膠原和纖維連接蛋白,在促腎纖維化引資等刺激下還能分泌具有降解腎小球基底膜作用的基質金屬蛋白酶和組織蛋白酶 ，從而在腎小球基底膜的代謝平衡中發揮重要作用 。

細胞特性 ：

1）細胞來源於實驗動物正常腎髒組織 。

2)細胞鑒定 ：廣譜角蛋白（PCK）或WT-1（Wilm'sTumorProtein）熒光染色為陽性 。

3)經鑒定細胞純度高於90% 。

4)不含有 HIV-1 、 HBV 、HCV 、支原體 、 、酵母和 。

5)細胞生長方式 ：不規則 ，含足突細胞，貼壁培養 。

推薦培養基：

老哥俱樂部推薦使用 DELF 原代 腎足 細 胞培養體係 作為體外培養的培養基 。

取材→分離→培養和維持

1 、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件 ，直接影響細胞的體外培養 。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免幹燥

⑤ 應注意組織類型 、分化程度 、年齡等

⑥ 作好記錄

2 、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由於多種細胞結合緊密 ，不利於各個細胞在體外培養中生長繁殖 ，必須將現有的組織塊充分散開 ，使細胞解離出來 。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液 、羊水 、胸水或腹水的懸液材料 ，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鍾 。經離心後由於各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞 。

(2)實體組織材料的分離方法

對於實體組織材料 ，由於細胞間結合緊密 ，為了使組織中的細胞充分分散 ，形成細胞懸液 ，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便 、快速,但對組織機械損傷大 ，而且細胞分散效果差,適用於處理纖維成分少的軟組織 。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀) ，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構鬆動 ，使團塊膨鬆 ，由塊狀變成絮狀 ，此時再采用機械法 ，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩 ，使細胞團塊得以較充分的分散 ，製成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液 ，接種培養後 ，細胞容易貼壁生長 。

大鼠促黃體(LH)elisa檢測試劑盒

通用型DAB顯色溶液

小鼠苯丙(LPA)elisa分析檢測試劑盒

elisa分析檢測試劑盒

非位素AP－BCIP/NBT法DNA斑點雜交試劑盒

體液D-葡萄糖激酶法定量檢測試劑盒

人Tau蛋白（TAU）elisa檢測試劑盒

大鼠氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)elisa檢測試劑盒

小鼠鬆弛肽(RLN)elisa檢測試劑盒

細胞分裂周期蛋白20B抗體 CDC20B

細胞球蛋白抗體 CYGB

TOMM70A蛋白抗體 TOMM70A

WDFY3蛋白抗體 WDFY3

AF750標記的軟骨蛋白聚糖抗體 ADAMTS5, Alexa Fluor 750 conjugated

APC標記人CD274 (B7-H1, PD-L1)單克隆抗體 human CD274 (B7-H1, PD-L1)/APC

巨細胞病毒PP65單克隆抗體 HCMV pp65

可溶性附著蛋白β-SNAP抗體 SNAP-beta

造血幹細胞特異性相關結合蛋白3抗體 HS1BP3

整合素αV（CD51）抗體 ITGAV

富含亮重複蛋白8D抗體 LRRC8D

鈣粘蛋白20抗體 Cadherin 20

HLA Class II DR4抗體 HLA Class II DR4

KATNAL2蛋白抗體 KATNAL2

葡萄糖6-磷酸脫氨酶2抗體 GNPDA2

染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體 MIS12

細胞脂質過氧化物反式十八碳四烯酸（cis-parinaric acid）比色法測定試劑盒

大鼠CD45分子(CD45)elisa生化檢測試劑盒

CD45 ELISA Kit

人高分子量脂聯素(HMW Adiponectin)elisa生化檢測試劑盒

兔腎足細胞HMWAdiponectinELISAKit

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商後選擇下述方式中的一種進行 。

1)1mL凍存細胞懸液裝於1.8ml的凍存管中,置於裝滿幹冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞後請盡快解凍複蘇細胞進行培養,如無法立刻進行複蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月 。

T-25培養瓶充滿培養基後進行常溫運輸;收到細胞後請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至於培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁 。

本公司的所有產品僅用於科學研究或者工業科研等非醫療目的 ，不可用於人類或動物的臨床診斷或治療 ，非藥用 ，非食用