老哥俱乐部

注意事项
1）试剂应按标签说明书储存
，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存
。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中
，密封保存

，以免变质。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好
。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染
，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7）底物A应挥发

，避免长时间打开盖子

。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒
。实验完成后应立即读取OD值
。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

产品名称：脂氧合酶同工酶3ELISA检测试剂盒
英文名称：LOX-3
产品货号
：EY-E98441
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格

：96T/48T 
    96T指可以做94个标本，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本
：体液

，血清，血浆
，细胞培养上清液，尿液
，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒
。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物
。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎
。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用
，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻
。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤

。不要在37℃或更高的温度加热解冻
。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻
。

FBP1  果糖1，6-二磷酸酯酶抗体 规格: 0.2ml*

GIMAP2  GTP酶IMAP家族成员2抗体 规格: 0.2ml*

BRCA1/BAP1  易感基因1抗体 规格: 0.1ml*

NQO1  醌氧化还原酶抗体 规格: 0.1ml*

DCUN1D4  DCUN1D4蛋白抗体 规格: 0.2ml*

Agrin  聚集蛋白抗体 规格: 0.1ml*

MHC Class II/MRC OX-6  组织相容性复合体2抗体 规格: 0.1ml*

Legumain  半蛋白酶抗体 规格: 0.2ml*

MAGEA5  黑色素瘤相关抗原5抗体 规格: 0.2ml*

PSMD10/Proteasome 26S S10  蛋白酶调解因子10抗体 规格: 0.2ml*

IM35  IM35蛋白抗体 规格: 0.2ml*

GRASP65  高尔基体外周膜蛋白p65抗体 规格: 0.2ml*

CHKL/Ethanolamine kinase beta  乙醇胺激酶β抗体 规格: 0.2ml*

Mouse Anti-human IgM/Cy7  Cy7标记的小鼠抗人IgM 规格: 0.1ml*

TCF9/GCF  转录因子9抗体 规格: 0.2ml*

脂氧合酶同工酶3ELISA检测试剂盒MDA-MB-436人癌细胞1ml/T75

MDA-MB-453人癌细胞1ml/T75

SK-BR-3人癌细胞1ml/T75

BT-474人导管癌细胞1ml/T75

BT-549人导管癌细胞1ml/T75

T-47D人导管癌细胞1ml/T75

SW579人甲状腺鳞癌细胞1ml/T75

COC1人卵巢癌细胞1ml/T75

COC1/DDP人卵巢癌细胞COC0耐药亚株
，对耐药1ml/T75

OVCAR-3人卵巢腺癌细胞1ml/T75

SK-OV-3人卵巢腺癌细胞1ml/T75

HeLa人细胞1ml/T75

Ca SKi人细胞1ml/T75

HaCaT人永生化纤维细胞,1ml/T75

ELISA 试验时
，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件
，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性
。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭
。 
     2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯
、聚苯乙烯
、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等
。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板
。不管何种载体
，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性

，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1
、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值
。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物
、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择：对供氢体的选择要求是价廉
、安全、有明显地显色反应
，而本身无色
。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间
，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入 
。