老哥俱乐部

ELISA 试验时，注意事项如下： 
     1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份
，以保证实验结果的准确性
。有时本底较高
，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。 
     2. 在ELISA中
，进行各项实验条件的选择是很重要的
，其中包括: 
     （1） 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等
。其形式可以是凹孔平板
、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被
，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性
，据此判明其吸附性能是否良好。 
     （2） 包被抗体（或抗原）的选择：将抗体（或抗原）吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0～9.6之间。吸附温度
，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时

。蛋白质包被的适浓度需进行滴定
：即用不同的蛋白质浓度（0.1
、1.0和10μg／ml等）进行包被后，在其它试验条件相同时
，观察阳性标本的OD值

。选择OD值大而蛋白量少的浓度
。对于多数蛋白质来说通常为1～10μg／ml。 
     （3） 酶标记抗体工作浓度的选择：首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定（见酶标记抗体部份）。然后再固定其它条件或采取“方阵法”（包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度）在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度
。 
     （4） 酶的底物及供氢体的选择
：对供氢体的选择要求是价廉

、安全、有明显地显色反应，而本身无色。有些供氢体（如OPD等）有潜在的致癌作用，应注意防护。有条件者应使用不致癌
、灵敏度高的供氢体
，如TMB和ABTS是目前较为满意的供氢体
。底物作用一段时间后，应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间，以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制，尤其是H2O2在临用前加入
。

产品名称：角蛋白5ELISA检测试剂盒
英文名称
：Keratin 5
产品货号：EY-E98539
产品规格：48T/96T
产品保存：2-8℃，有效期6个月
主要组成成分：试剂 
    性状：液体 
    产品规格：96T/48T 
    96T指可以做94个标本
，2个标准对照 
    48T指可以做47个标本
，1个标准对照 
    96T-84个样本 
    48T-42个样本 
    待检样本：体液，血清
，血浆，细胞培养上清液
，尿液，组织匀浆,心房水标本等等。 

样品收集
、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管
。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐
、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存
，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒
，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻

。
注意事项
1）试剂应按标签说明书储存
，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃
，不可保存。
2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中
，密封保存，以免变质

。
3）不用的其它试剂应包装好或盖好
。不同批号的试剂不要混用。保质前使用
。
4）使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器
。
5）使用干净的塑料容器配置洗涤液
。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水
。
7）底物A应挥发
，避免长时间打开盖子
。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触
，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9）按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作
。

AMP deaminase 1  苷单磷酸脱氨酶1抗体 0.2ml*

OAT-1/SLC22A6  阴离子转运蛋白-1抗体 规格: 0.1ml*

CA IX  碳酸酐酶9抗体 规格: 0.1ml*

RAB6B  RAS基因相关蛋白RAB6B抗体 规格: 0.1ml*

EHZF/ZN521  锌指蛋白521抗体 规格: 0.1ml*

NLGN2  神经连接蛋白2抗体 规格: 0.2ml*

phospho-MAP3K7IP1(Ser423)  磷酸化转化生因子β活化激酶结合蛋白1抗体 规格: 0.1ml*

SERPINB1  蛋白酶抑制剂B1抗体 规格: 0.2ml*

phospho-c-Raf(Tyr341)  磷酸化原基因c-Raf抗体 规格: 0.1ml*

Torc2/Crtc2  CREB转录共激活因子TORC2抗体 规格: 0.1ml*

phospho-SLK/FYN (Tyr530)  磷酸化蛋白激酶Fyn/同步原基因抗体 规格: 0.1ml*

AMID/AI 试剂盒   线粒体凋亡诱导因子2抗体 规格: 0.2ml*

GTP cyclohydrolase 1/GTP-CH-1  三磷酸鸟苷环解酶抗体 规格: 0.2ml*

Cathepsin B  组织蛋白酶B抗体 规格: 0.1ml*

Chicken IgY  兔抗鸡IgY抗体 规格: 1mg*

角蛋白5ELISA检测试剂盒LCL1豹猫肺成纤维样细胞1ml/T75

LCL2豹猫肺成纤维样细胞1ml/T75

LCL3豹猫肺成纤维样细胞1ml/T75

LCL4豹猫肺成纤维样细胞1ml/T75

MPCL1狸肺成纤维样细胞1ml/T75

MPCL2狸肺成纤维样细胞1ml/T75

MPCL3狸肺成纤维样细胞1ml/T75

MPCL4狸肺成纤维样细胞1ml/T75

LDG-1大耳山羊肺细胞1ml/T75

OAR-L1绵羊肺细胞1ml/T75

BFR-L1大额牛肺细胞1ml/T75

MV-1-Lu貂肺上皮细胞1ml/T75

MV-1-Lu（NB L-7）貂肺上皮细胞1ml/T75

DogL1狗肺成纤维样细胞1ml/T75