老哥俱乐部

下列是产品的订购信息：

细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构
、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳
、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理
、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后
，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时
，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察
、检测和记录
采用各种研究技术
：如倒置生物显微镜、荧光显微镜
、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。
​
培养操作步骤 ：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布； 
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）； 
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时； 
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中

，使盖玻片*浸在培养液中； 
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片
，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测
。 
实验要点及说明
：
1．本方法适用于贴壁细胞培养
，而不适用于悬浮细胞培养
，悬浮细胞可使用滴片法； 
2．所使用的盖玻片应该为优质玻璃
，并经过铬酸洗液处理
； 
3．盖玻片非常薄，易碎，取放盖玻片时动作要轻

； 
4．如果需要更多生长状态一致的细胞，可以使用较大的培养皿
，但不宜过大

，以避免培养液的浪费和增加污染机率； 
5．如果细胞贴壁生长能力较差
，可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干
。

H-97(人高转移肝细胞)5×106cells/瓶×2

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus串珠菌 Leuconostoc lactis

SF-295(人XG恶性胶质瘤细胞)5×106cells/瓶×2

血平板 规格： 90mm×20个 用途
： 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－2010，GB/T4789.37－2008 ，GB 4789.30－2...

YT肉汤/YT BrothBR250克国产/进口

NCI-H2170(人肺鳞细胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

2V6.11(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×2

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

Rambach琼脂250克国产/进口

浅天蓝链霉菌 Streptomyces coerulescens大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

人成骨肉瘤细胞MG-63

EBTr (NBL-4)细胞，牛胚气管细胞规格8/第八/第八因子相关抗原factor VIII 0.5mg

脂肪酸合成酶FASN/Fatty Acid Synthase 1 0.5mg

丝聚蛋白/中间丝蛋白抗原FLG(filaggrin)peptide 0.5mg

脂肪酸去饱和酶1FADS1 1mg

γ1氨基丁酸偶联血蓝蛋白GABA/KLH  1mg

糖原合酶激酶-3 beta（多肽）GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 0.5mg

γ1氨基丁酸偶联牛血清白蛋白GABA/BSA  1mg

荧光素标记Gentamicin/FITC 1ml

糖原合酶激酶-3α （多肽）GSK-3 Alpha 0.5mg

磷酸化糖原合酶激酶-3β （多肽）phospho-GSK-3 Beta(Ser9) 0.5mg

磷酸化糖原合酶激酶3α/β抗原GSK3 alpha + beta (phospho Y279 + Y216) 0.5mg

细胞培养方法：
1
、细胞传代
：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清
，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后
，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化
；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min
，弃上清
；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中

，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化
，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀
，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3

、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒

，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存

。