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GT-17檢測ELISA試劑盒在實驗時哪些需要注意的事項
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:607 更新時間
:2021-11-24
老哥俱樂部在做GT-17檢測ELISA試劑盒實驗的時候有哪些需要注意的事項呢
?今天小編為大家羅列了幾個比較常見的事項
,需要能讓大家盡量避免誤區
。
一
、包被
1
、將包被抗原用包被緩衝液配製包被液
,每孔取100 mL加入酶標板
,蓋好蓋板膜
,包被條件如下表
,4℃ 16-20h包被時酶標板可以疊放
,而37℃ 2h包被時酶標板之間的間距應保持一致(一般為5cm)
。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距
,如培養箱從底部產熱
,則應增加下層酶標板間的間距為10cm
。
2
、包被加樣采取吸二打一的方式
,應避免加在孔壁上部
,若不慎滴加在孔壁上
,根據該滴溶液是否應加入孔內再做判斷
,若應加入
,則小心振蕩使其落入孔底
,反之則用吸水紙小心吸出
,並注意不可濺出
,不可產生氣泡
。
3
、包被前預吸查看槍頭是否合格
,水流是否一致
,不一致者應更換槍頭
,包被應采用槍頭
,每包被一塊板
,應將槍頭套緊
,並且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致
,在包被過程中若出現任何小問題
,都應將此塊板做出記號
,以便後期組裝入庫時淘汰
。
4
、若采用37℃ 2h包被模式
,則應給酶標板編碼
,保證每塊板子的包被時間一致
。
二
、洗板
1
、包被後要進行兩次洗滌
,250微升/孔
,洗滌完畢後
,應在毛巾上拍幹參與液體
,並及時進行下一步封閉
。
2
、 洗滌時要注意查看水流是否一致
,在洗滌程中若出現任何小問題
,都應將此塊板做出記號
,以便後期組裝入庫時淘汰
。
三、封閉
1、封閉液應提前一小時取出初步回溫
,用前搖勻
,每孔取180 mL加入酶標板
,蓋好蓋板膜
,37℃封閉 1.5h, 酶標板之間的間距應保持一致(一般為5cm)
。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距
,如培養箱從底部產熱
,則應增加下層酶標板間的間距為10cm 。
2
、封閉加樣采取吸一打一的方式
,GT-17檢測ELISA試劑盒應避免加在孔壁上部
,若不慎滴加在孔壁上
,根據該滴溶液是否應加入孔內再做判斷
,若應加入
,則小心振蕩使其落入孔底
,反之則用吸水紙小心吸出
,殘留在槍頭內的溶液不要打出 以免產生氣泡
。並注意不可濺出
,不可產生氣泡
3
、封閉前預吸查看槍頭是否合格
,水流是否一致
,不一致者應更換槍頭
,封閉應采用槍頭
,每封閉一塊板
,應將槍頭套緊
,並且在包被的過程中要注意查看吸液是否一致
,在封閉過程中若出現任何小問題,都應將此塊板做出記號
,以便後期組裝入庫時淘汰
。
四
、烘幹裝袋
1
、封閉完後
,摔倒孔內液體
,並在毛巾上拍幹
,接下來采取烘幹或者晾幹的方式*幹燥酶標板
。烘幹
:37 ℃倒置(不加蓋板膜或用自封袋)
,每5塊板烘幹30 min
,隨著板子數量增多時間相應延長
,如100塊板
,需要烘3 h
,依次類推
;晾幹
:底部鋪一層幹淨的A4紙或者吸水紙
,倒置板子
,在頂層鋪一層蓋住避光
,室溫晾18-24h
。
2
、GT-17檢測ELISA試劑盒板子幹燥後
,應及時裝入自封袋
,按照每塊板1袋幹燥劑的量裝入
,袋子外麵寫好板子製備日期
,放入本成品庫冷藏環境保存備用
。
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