IL-22 Elisa Kit試驗以靈敏度較高 、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的應用 ，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大 ，如不注意 ，有可能導致顯色不全 、花板等結果 。我將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結於下 ，以期給同行帶來一些啟發 ，提高試驗質量 。下麵分析IL-22 Elisa Kit試驗操作中可能影響結果的原因 ，並給出相應的解決辦法 。

　　一 、選擇試劑

　　選擇質量優良的檢測試劑 ，嚴格按照試劑說明書進行操作 ，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鍾 。

　　二 、加樣

　　可能原因 ：

　　1）IL-22 Elisa Kit血清或血漿標本分離不好即進行加樣 ； 2）手工操作中 ，加樣板過多造成加樣後放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時) ； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外 。

　　解決辦法 ：

　　1） 標本為血清 ：將血液先自然存放1-2小時後 ，再用3000rmp離心15分鍾 ；標本為血漿 ：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管 ，采血後必須立即顛倒混合5-10次 ，放置一段時間後 ，3000rpm離心15分鍾 ；若在幾天內檢測 ，可放在2-8℃冰箱中 ，若要貯存 ，則置於-20℃的低溫冰箱內 。 2) 加樣後及時放入孵箱 。 3) 加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹 。 4) 如果采用AT或其他全自動加樣 ，IL-22 Elisa Kit選擇FAME或其他後處理儀器加酶試劑 。 5) 標本較多時 ，請分批操作 。

　　三 、 孵育

　　可能原因 ：

　　1) 孵育時未貼封片或加蓋 ，使標本或稀釋液蒸發 ，吸附於孔壁 ，難於清洗* ； 2) 孵育時間人為延長 ，導致非特異性結合緊附於反應孔周圍 ，難以清洗* 。

　　解決辦法 ：

　　1) 貼封片或加蓋 ； 2) 按說明步驟嚴格控製操作時間 。

　　四 、洗板

　　IL-22 Elisa Kit可能原因 ：

　　1) 采用手工洗板 ，孔與孔之間液體交叉 。 2) 采用半自動洗板機洗板時 ，洗液量不足 ，導致洗板不* ；洗板針堵塞 ，抽吸不* ；洗板不暢，導致洗板效果差 。 3) 反應板過多造成洗板等待時間長 。

　　解決辦法 ：

　　1) 保證洗液注滿各孔 ，洗板針暢通 ，洗完板後在吸水紙（選擇幹淨 、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍幹 ； 2) 合理安排 ，或多用幾台洗板機 。

　　五 、顯色

　　可能原因 ：

　　1) IL-22 Elisa Kit顯色劑配製後放置時間過長或使用過期顯色劑 ； 2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流 。

　　解決辦法 ： 1) 顯色劑盡量在臨用前配製 ，堅持不用過期顯色劑 ，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用 ； 2) 加樣時保持顯色劑不外流 ； 3) A 、B液應避免接觸金屬器械 。

　　六 、終止

　　可能原因如加終止液時產生較多氣泡 ，導致假陽性增加 。所以在加終止液時應避免產生氣泡 。

　　七 、讀板

　　如讀板時板底不清潔等 。應保證酶標板清潔 。所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸 ； 盡可能實現ELISA檢測標準自動化 ，有效提高檢測質量 。

　　IL-22 Elisa Kit在實際操作中 ，除了選擇優良試劑外 ，必須嚴格按照操作步驟進行操作 ，同時作好室內質控 、室間質評 ，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本 ，才能保證檢測質量 。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀 ，這對於實現ELISA標準化檢測 、提高檢測質量起到了重要作用 。