方法被廣泛應用於各種抗原和抗體測定.在Elisa測定中影響因素較多,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結果.引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有
:標本因素
;試劑因素
;操作因素.
1.樣品稀釋
一般產品的樣品稀釋倍數均通過大量試驗確定,以保證試驗的靈敏度和特異性.酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應,如果血清不稀釋,不可避免會產生很強的非特異性反應,出現假陽性.
2.試劑盒平衡
Elisa中所有試劑和板條均應在試驗前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鍾以上.平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育時間相對縮短,ELISA反應不夠充分.冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鍾.
3.樣品和試劑的混勻
在稀釋前、後的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗的均一性.
4.加樣
加樣是一項很重要的步驟.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產生氣泡.加樣太快,無法保證微量加樣的準確性和均一性.加在孔壁上部的非包被區,易導致非特異吸附.
5.溫育
溫育是測定中影響測定成敗zui為關鍵的一個因素.ELISA作為一種固相免疫測定,抗原抗體的結合反應在固相上進行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結合,必須在一定的溫度條件下反應一定的時間.
Guanfacine Hydrochloride 鹽酸胍法辛標準品 29110-48-3 125mg
Glipizide 美比達標準品 29094-61-9 125mg
Loxapine Succinate 丁二酸洛沙平標準品 27833-64-3 125mg
Articaine Hydrochloride 標準品 23964-57-0 125mg
Nifedipine 標準品 21829-25-4 125mg
Levamisole Hydrochloride 標準品 16595-80-5 125mg
Fluphenazine Hydrochloride 鹽酸氟標準品 146-56-5 125mg
Naratriptan Hydrochloride 鹽酸那拉曲坦標準品 143388-64-1 125mg
標準品 1397-89-3 125mg
Ursodiol 標準品 128-13-2 125mg
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