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      GSK Elisa Kit的模式及具体的实验条件
      点击次数:1000 更新时间:2018-03-05

      通常在板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果。包被的zui适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。
      封闭是否必要,取决于ELISA的模式及具体的实验条件 。并非所有的ELISA固相均需封闭,封闭不当反而会使阴性本底增高。一般说来 ,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的 ,操作时洗涤* ,不经封闭也可得到满意的结果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封闭剂的作用。但在间接法测定中 ,封闭一般是不可少的(见2.2.2)。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保存数月。
      封闭(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。抗原或抗体包被时所用的浓度较低,吸收后固相载体表面尚有未被占据的空隙 ,封闭就是让大量不相关的蛋白质充填这些空隙,从而排斥在ELISA试剂盒其后的步骤中干扰物质的再吸附。封闭的手续与包被相类似。zui常用的封闭剂是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封闭剂的 。脱脂奶粉也是一种良好的封闭剂,其zui大的特点是价廉 ,可以高浓度使用(5%)。高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封闭剂使用,但由于奶粉的成份复杂 ,而且封闭后的载体不易保存,因此在试剂盒的制备中较少应用 。
      151006-14-3         普伐他汀1,1,3,3-四甲基氨基丁烷标准品    200mg
      1508-76-5     Procyclidine Hydrochloride    盐酸丙环定标准品    200mg
      1508-75-4     Tropicamide    标准品    200mg
      1508-65-2     Oxybutynin Chloride     氯化奥昔布宁标准品    200mg
      150399-21-6    Balsalazide Disodium    标准品    200mg
      150-13-0    Aminobenzoic Acid    氨苯甲酸标准品    200mg
      149845-06-7     Saquinavir Mesylate     甲磺酸沙奎拉韦标准品    200mg
      149-32-6    Erythritol    赤藓糖醇标准品    200mg
      148408-66-6    Docetaxel    三水多烯标准品    200mg

       

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