屬固相免疫測定 ，抗原 、抗體的結合隻在固相表麵上發生 。以抗體包被的夾心法為例 ，加入板孔中的標本 ，其中的抗原並不是都有均等的和固相抗結合的機會 ，隻有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸 。這是一個逐步平衡的過程 ，因此需經擴散才能達到反應的終點 。在其後加入的酶標記抗體與固相抗原的結合也同樣如此 。這就是為什麽ELISA反應總是需要一定時間的溫育 。
溫育常采用的溫度有43℃ 、37℃ 、室溫和4℃（冰箱溫度）等 。37℃是實驗室中常用的保溫溫度 ，也是大多數抗原抗體結合的合適溫度 。在建立ELISA方法作反應動力學研究時 ，實驗表明 ，兩次抗原抗體反應一般在37℃經1～2小時 ，產物的生成可達 。為加速反應 ，可提高反應的溫度 ，有些試驗在43℃進行 ，但不宜采用更高的溫度 。抗原抗體反應4℃更為* ，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜 ，以形成zui多的沉澱 。但因所需時間太長 ，在ELISA中一般不予采用 。

1)ELISA試劑盒實驗洗滌時各孔均需加滿液體 ，防止孔口有遊離酶不能洗淨 。
2)用於檢測的樣品應保持新鮮 。
3)用戶在初次使用試劑盒時 ，應將各種試劑管離心數分鍾 ，以便試劑集中到管底 。
4)每次實驗留一孔作為空白調零孔 ，該孔不加任何試劑 ，隻是zui後加底物溶液及2N H2SO4 。測量時先用此孔調OD值至零 。
5)要確保微量加樣器的準確性 ，可以使用蒸餾水和電子天平進行確定(由於蒸餾水不含雜質 ，溫度環境為20%左右時 ，lmL的水可以看作是lg 、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應該將其zui高量程和zui低量程進行確定 。
6)在使用微量加樣器時 ，吸取不同瓶子中液體後要更換槍頭 ，即使吸取標準品溶液 。
7)吸取液體時速度不易太快 ，以免產生氣泡 ，吸取的量不夠準確 。
8).將液體加到酶標孔中時 ，避免槍頭和孔內液體接觸 ，可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸 ，液滴會自然流下去 。吸入液體時的的方法是吸兩檔打一檔 ，防止由於槍頭的毛細作用使得部分液體不能流出而造成的誤差 。
9)吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸 ，減少誤差 。
10)實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出 ，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同 ，酶標板隻要取出所需量 。
55557-30-7     Levopropoxyphene Napsylate    萘磺酸左丙氧芬標準品    300mg
83915-83-7     Lisinopril     賴諾普利標準品    300mg
554-13-2     Lithium Carbonate    標準品    300mg
110-16-7     Maleic Acid     馬來酸標準品    300mg
591-27-5    m-Aminophenol    間氨基標準品    300mg
3458-28-4     Mannose    甘露糖標準品    300mg
73816-42-9     Meclocycline Sulfosalicylate     磺基水楊酸氯甲烯標準品    300mg
119478-56-7     Meropenem     標準品    300mg
110-42-9     Methyl Caprate     癸酸甲酯標準品    300mg
106-70-7     Methyl Caproate     己酸甲酯標準品    300mg
111-11-5     Methyl Caprylate     辛酸甲酯標準品    300mg

 

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