任何的離不開的原料 ，如抗原抗體 ，酶等 。以前用於免疫測定的抗原通常為各種純化抗原 ，而抗體則為純化抗原免疫動物後獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術得到的單克隆抗體 ，而抗原或抗體的標記物如酶標結合物則通過各種製備 。近年來 ，隨著分子生物學的發展 ，使用基因工程方法製備各種特殊的抗原或抗體及其酶結合物等免疫測定試劑幾成為現實的新一代試劑 ，各種新型使用的測定方法也不斷出現 。
1.1當標本采集保存不當產生溶血時 ，紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中 ，血紅蛋白具有過氧化物酶的性質 ，其通過吸附或“PP效應"（蛋白質間相互吸附的現象）結合後 ，可催化A 、B液顯色而造成假陽性
1.2標本采集保存不當致細菌汙染 ，菌體中可能含有內源性HRP ，會產生假陽性反應 ；標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG聚合 ，易使間接法的試驗本底加深 。因此 ，標本宜在新鮮時檢測 。
1.3反複凍融血清會使抗體效價跌落 ，所以測抗體的血清標本如需保存做多次檢測 ，宜少量分裝凍存 。
2 、加樣
2.1如果 樣品稀釋液少加或血清多加 ，都會引起本底增高 。對於間接法來說 ，受上述兩個因素影響更大 。因為血清中受檢的特異性IgG隻占IgG其中的一小部分 。IgG的吸附性很強 ，非特異性IgG可直接吸附到固相載體上 ，有時也可吸附到包被抗原的表麵 。這些非特異性的IgG均可以和酶標二抗發生反應而造成較高陰性本底或假陽性 。如果加入的血清過多 ，高於規定的稀釋倍數 ，極易造成高值陰性 。反之 ，造成假陰性 。
2.2  如果加入的酶結合物過多或加在較高的孔壁上或孔口 ，也會引起本底升高或假陽性 。
2.3如果血液未開始凝固或凝固不*時就強行離心分離血清 ，此時的血清中仍留部分纖維蛋白原 ，在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊 ，易造成假陽性結果 。
*    2～8°C    100毫克    溴甲酚綠鈉
*        1公斤    甲基綠
*    RT    25克    天青I
*    2～8°C    250克    橙黃Ⅱ
*    保存 ：-20℃    100u    丫啶黃素
*        10毫克    甲基紫
*        250ku    固紫醬GBC鹽
*        2500u    蘇丹I

 

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