測定步驟 :固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果 。
ELISA試劑盒操作較繁雜,在操作中應注意以下5個方麵 。
1. 隨著病情的進展或由其他因素影響 ,某些抗體在機體內的含量發生大幅波動 ,因此有必要對標本進行預處理 。間接法測定中 ,標本適當稀釋還可降低非特異性反應 。
2. 加樣一般使用加液器 ,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣 :加標本 、加酶結合物 、加底物和加終止液 。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴 ,以免交叉汙染 。加酶結合物 、底物和終止液時則不需更換吸嘴 。
3. 在成批手工檢測中 ,還應注意操作時差的影響 。加樣及混勻時間的差異 ,使抗原抗體反應和酶促反應時間不一致 ,對競爭法及定量檢測影響很大 ,不注意可能會導致錯誤結果或定量不準 。
4. 洗滌是ELISA試劑盒操作過程中決定實驗成敗的一個關鍵步驟 。目的是除去未結合的免疫反應物 ,終止抗原抗體反應 ,除去標本中與反應無關的成分 、遊離的酶標物以及反應過程中吸附於固相載體上的非特異性物質 。可用洗板機洗板或手工洗板 ,前者洗滌質量較好 ,各反應孔洗滌效果均一 ,批內 、批間差異小 ,手工洗板應注意控製各孔洗滌效果 ,差異不宜太大 。
5. 準確判定結果須使用測讀儀
,比色法判讀可選擇單波長或雙波長
,根據反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片
,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值
。酶標儀具有良好的重複性
。
25-羥基-原人參二醇 25-OH-Protopanaxdiol ≥97% 純度
:
25-羥基-原人參三醇 25-OH-Protopanaxtiol ≥97% 純度
:
25-羥基-原人參三醇 25-OH-Protopanaxtiol ≥97% 純度:
2-羥基澤蘭內酯 2-Hydroxyeupatolide ≥97% 純度
:
2-O-沒食子酰基金絲桃苷 2-O-galloylhyperin ≥98% 純度
:
丁香醛 3,5-Dimethoxy-4-hydroxybenzaldehyde ≥97% 純度
:
3,6’-二芥子酰基蔗糖 3,6’-Disinapoyl sucrose ≥95% 純度
:
3’-甲氧基 3’- Methoxy Puerarin ≥99% 純度
:
上一篇 肺表麵活性物質相關蛋白CElisa試劑盒實驗中常見的問題對策 下一篇 檢測抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒前你要做什麽 ?