行將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表麵
,使酶符號的抗原抗體反響在固相表麵進行的技能
。該技能可用於檢查大分子抗原和特異性抗體等
,具有迅速
、活絡
、簡潔
、載體易於標準化等長處
。酶聯免疫吸附試驗中血清的詳細處理保留定見
:
(1)要留意防止呈現嚴峻溶血
。血紅蛋白中含有血紅素基團
,其有相似過氧化物的活性
,因而
,在以HRP為符號酶的ELISA測定中
,如血清標本中血紅蛋白濃度較高
,則其就很簡單在溫育過程中吸附於固相
,然後與後邊加入的HRP底物反響顯色
。
(2)ELISA試劑盒樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌汙染
,一則細菌的成長
,其所排泄的一些酶也許會對抗原抗體等蛋白發生分化效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸杆菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應酶作符號的測定辦法發生非特異性攪擾
。
(3)血清標本如是以無菌操作別離
,則可以在2~8℃下保留一星期
,如為有菌操作,則主張冰凍保留
。樣本的保留
,應在-70℃以下
。
(4)冰凍保留的血清標本須留意防止因停電等形成的重複凍融
。標本的重複凍融所發生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發生損壞效果
,然後導致假陰性成果
。此外
,凍融標本的混勻亦應留意
,不要進行劇烈振動
,重複倒置混勻即可
。
(5)標本在保留中如呈現細菌汙染所造成的的混濁或絮狀物時
,應離心沉積後取上清檢查
。
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