操作步驟
1.豬總蛋白(TP)酶聯免疫分析試劑盒標準品的稀釋
:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋
。
360μg/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
180μg/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
90μg/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
45μg/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
22.5μg/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2.加樣
:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑
,其餘各步操作相同)
、標準孔
、待測樣品孔
。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl
,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl
,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)
。加樣將樣品加於酶標板孔底部
,盡量不觸及孔壁
,輕輕晃動混勻
。
3.溫育
:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾
。
4.配液
:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5.洗滌
:小心揭掉封板膜
,棄去液體
,甩幹
,每孔加滿洗滌液
,靜置30秒後棄去
,如此重複5次
,拍幹
。
6.加酶
:每孔加入酶標試劑50μl
,空白孔除外
。
7.溫育
:操作同3
。
8.洗滌
:操作同5
。
9.顯色
:每孔先加入顯色劑A50μl
,再加入顯色劑B50μl
,輕輕震蕩混勻
,37℃避光顯色10分鍾.
10.終止
:每孔加終止液50μl
,終止反應(此時藍色立轉黃色)
。
11.測定
:以空白空調零
,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)
。 測定應在加終止液後15分鍾以內進行
。
注意事項
1.豬總蛋白(TP)酶聯免疫分析試劑盒試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鍾後方可使用
,酶標包被板開封後如未用完
,板條應裝入密封袋中保存
。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出
,稀釋時可在水浴中加溫助溶
,洗滌時不影響結果
。
3.各步加樣均應使用加樣器
,並經常校對其準確性
,以避免試驗誤差
。一次加樣時間控製在5分鍾內
,如標本數量多
,使用排槍加樣
。
4.請每次測定的同時做標準曲線
,做複孔
。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大於標準品孔*孔的OD值)
,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)後再測定
,計算時請zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)
。
5.封板膜隻限一次性使用
,以避免交叉汙染
。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行
,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品
,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理
。
9.本試劑不同批號組分不得混用
。
豬總蛋白(TP)酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存
:
;2-8℃
。
2.有效期
:6個月