ELISA測定的標本十分廣泛 ，體液（如血清） 、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液 、糞便）等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份 。有些標本可直接進行測定（如血清 、尿液） ，有些則需經預處理（如糞便和某些分泌物） 。大部分ELISA檢測均以血清為標本 。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外 ，其他成份均同等於血清 。製備血漿標本需借助於抗凝劑 ，而血清標本隻要待血清自然凝固 、收縮後即可取得 。ELISA除特殊情況外 ，在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本 。在ELISA中血漿和血清可同等應用 。血清標本可按常規方法采集 ，應注意避免溶血 ，紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質 ，以HRP為標記的ELISA測定中 ，ELISA溶血標本可能會增加非特異性顯色 。

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