洗滌方法 :
1. 自動洗板機 :每孔加入洗滌液350μl ,注入與吸出間隔60秒 。洗板5次 。
2. 手工洗板 :甩盡孔內液體 ,在潔淨的吸水紙上拍幹 ,每孔加洗滌液350μl ,浸泡1-2分鍾 ,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體 ,在厚的吸水紙上拍幹 。洗板5次 。
實驗開始前 ,各試劑均應平衡至室溫 ;試劑或樣品配製時 ,均需充分混勻 ,並盡量避免起泡 。
1.加樣 :分別設空白孔 、標準孔 、待測樣品孔 。空白孔加樣品稀釋液100μl ,餘孔分別加標準品或待測樣品100μl ,注意不要有氣泡 ,加樣時將樣品加於酶標板底部 ,盡量不觸及孔壁 ,輕輕晃動混勻 。給酶標板覆膜 ,37℃孵育2小時 。為保證實驗結果有效性 ,每次實驗請使用新的標準品溶液 。
2.棄去液體 ,甩幹 ,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鍾內配製) ,酶標板加上覆膜 ,37℃溫育1小時 。
3.棄去孔內液體 ,甩幹 ,洗板 3次 ,每次浸泡1-2分鍾 ,大約350μl /每孔 ,甩並在吸水紙上輕拍將孔內液體拍幹 。
幹4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鍾內配製)100μl ,加上覆膜 ,37℃溫育1小時 。
5.棄去孔內液體 ,甩幹 ,洗板5次 ,方法同步驟3 。
6.每孔加底物溶液100μl ,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鍾左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長 ,但不可超過30分鍾 。當標準孔出現明顯梯度時 ,即可終止) 。
7.每孔加終止液50μl ,終止反應 ,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同 。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值) 。應提前打開酶標儀電源 ,預熱儀器 ,設置好檢測程序 。
9.實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束 。
alpha Actinin 4-Loading Controlα-輔肌動蛋白4(內參)抗體
Alkaline Phosphatase堿性磷酸酶抗體
AU1 tagAU1 tag標簽抗體
AEBP1脂肪細胞增強結合蛋白1
AKT1蛋白激酶B
AKT1蛋白激酶B
ANGL2血管生成素樣蛋白2抗體
Angiopoietin 4血管生成素3/血管生成素4抗體
Annexin I膜粘連蛋白 I抗體
Annexin A2膜粘連蛋白 Ⅱ抗體
ATF1活化轉錄因子1抗體
Aquaporin 4 水通道蛋白4抗體
ATF2活化複製因子2抗體
AMPK beta 1腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
Amylin糖尿病相關肽/胰島澱粉樣肽抗體
Angiotensin II血管緊張素Ⅱ抗體
AT2R血管緊張素Ⅱ受體1抗體
Angiopoietin-1血管生成素-1抗體
Annexin V膜粘連蛋白5抗體
Annexin V重組膜粘連蛋白5抗體
alpha Adaptin銜接蛋白α-Adaptin抗體
APAF1(CT)凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)
APAF1(NT)凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)
ABCG2三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員2抗體
APOE載脂蛋白E抗體
Amyloid Precursor Protein澱粉樣肽前體蛋白抗體
Aquaporin 2水通道蛋白-2抗體
AGT血管緊張素原抗體
Androgen receptor雄激素受體抗體
AVEN細胞死亡調節蛋白抗體(凋亡 、半胱胺酸蛋白酶激活抑製劑)
Axin1軸蛋白1抗體