洗滌方法 ：
1. 自動洗板機 ：每孔加入洗滌液350μl ，注入與吸出間隔60秒 。洗板5次 。
2. 手工洗板 ：甩盡孔內液體 ，在潔淨的吸水紙上拍幹 ，每孔加洗滌液350μl，浸泡1-2分鍾 ，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體 ，在厚的吸水紙上拍幹 。洗板5次 。
實驗開始前 ，各試劑均應平衡至室溫 ；試劑或樣品配製時 ，均需充分混勻 ，並盡量避免起泡 。
1.加樣 ：分別設空白孔 、標準孔 、待測樣品孔 。空白孔加樣品稀釋液100μl ，餘孔分別加標準品或待測樣品100μl ，注意不要有氣泡 ，加樣時將樣品加於酶標板底部 ，盡量不觸及孔壁 ，輕輕晃動混勻 。給酶標板覆膜 ，37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性 ，每次實驗請使用新的標準品溶液 。
2.棄去液體 ，甩幹 ，每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鍾內配製) ，酶標板加上覆膜 ，37℃溫育1小時 。
3.棄去孔內液體 ，甩幹 ，洗板 3次 ，每次浸泡1-2分鍾 ，大約350μl /每孔 ，甩幹並在吸水紙上輕拍將孔內液體拍幹 。
4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鍾內配製)100μl ，加上覆膜 ，37℃溫育1小時 。
5.棄去孔內液體 ，甩幹 ，洗板5次 ，方法同步驟3 。
6.每孔加底物溶液100μl ，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鍾左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長 ，但不可超過30分鍾 。當標準孔出現明顯梯度時 ，即可終止) 。
7.每孔加終止液50μl，終止反應 ，此時藍色立轉黃色 。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同 。
8.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值) 。應提前打開酶標儀電源 ，預熱儀器 ，設置好檢測程序。
9.實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束 。
小鼠內皮素-1(mouse Endothelin-1)
小鼠噬酸性粒細胞趨化因子(mouse Eotaxin)
小鼠促紅細胞生成素(mouse EPO)
小鼠紅細胞生成素受體(mouse EPOR)
小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(mouse ECP)
小鼠上皮中性粒細胞活化肽-78(mouse ENA-78)
小鼠血管內皮抑素(mouse Endostatin)
小鼠腎上腺素(mouse EPI)
小鼠內皮細胞一氧化氮合酶(mouse eNOS)
小鼠雌二醇(mouse E2)
小鼠促卵泡素(mouse FSH)
小鼠凋亡相關因子(mouse Fas)
小鼠凋亡相關因子配體(mouse Fas Ligand)
小鼠酸性成纖維生長因子(mouse a-FGF)
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)
小鼠Fibronectin（mouse Fibronectin）
小鼠Flt3(mouse Flt3)
小鼠Flt3配體(mouse Flt3 Ligand)
小鼠纖維連結蛋白(mous FN)
小鼠Fractalkine（mouse Fractalkine）
小鼠X(mouse FX)
小鼠纖維蛋白原(mouse Fibrinogen)
小鼠Foxp3(mouse Foxp3)
小鼠半乳糖凝集素-9(mouse Galectin-9)
小鼠胃泌素(mouse Gastrin)
小鼠Ghrelin(mouse Ghrelin)
小鼠胰高血糖素樣肽-1(mouse GLP-1)
小鼠胰高血糖素(mouse Glucagon)
小鼠GRO(mouse GRO)
小鼠神經膠質細胞衍化營養因子(mouse GDNF)
小鼠生長因子(mouse GH)
小鼠心肌轉錄因子3(mouse GATA3)
小鼠心肌轉錄因子4(mouse GATA4)