操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣 :在酶標包被板上設標準品孔10孔 ,在di一 、第二孔中分別加標準品100μl ,然後在di一 、第二孔中加標準品稀釋液50μl ,混勻 ;然後從di一孔 、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔 ,再在第三 、第四孔分別加標準品稀釋液50μl ,混勻 ;然後在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五 、第六孔中 ,再在第五 、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul ,混勻 ;混勻後從第五 、第六孔中各取50μl分別加到第七 、第八孔中 ,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl ,混勻後從第七 、第八孔中分別取50μl加到第九 、第十孔中 ,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl ,混勻後從第九第十孔中各取50μl棄掉 。(稀釋後各孔加樣量都為50μl ,濃度分別為180 ng/L ,120 ng/L ,60 ng/L ,30 ng/ ,15 ng/L) 。
2. 加樣 :分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑 ,其餘各步操作相同) 、待測樣品孔 。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl ,然後再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍) 。加樣將樣品加於酶標板孔底部 ,盡量不觸及孔壁 ,輕輕晃動混勻 。
3. 溫育 :用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾 。
4. 配液 :將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋後備用 。
5. 洗滌 :小心揭掉封板膜 ,棄去液體 ,甩幹 ,每孔加滿洗滌液,靜置30秒後棄去 ,如此重複5次 ,拍幹 。
6. 加酶 :每孔加入酶標試劑50μl ,空白孔除外 。
7. 溫育 :操作同3。
8. 洗滌 :操作同5 。
9. 顯色 :每孔先加入顯色劑A50μl ,再加入顯色劑B50μl ,輕輕震蕩混勻 ,37℃避光顯色15分鍾.
10. 終止 :每孔加終止液50μl ,終止反應(此時藍色立轉黃色) 。
11. 測定 :以空白空調零 ,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 。 測定應在加終止液後15分鍾 。
phospho-Androgen Receptor (Ser515)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser791)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Ser94)磷酸化雄激素受體抗體
phospho-Androgen Receptor (Tyr363)磷酸化雄激素受體抗體
ANKK1錨定蛋白重複結構域蛋白激酶ANKK1抗體
phospho-alpha Adducin (Thr445)磷酸化內收蛋白抗體
Annexin A11膜粘連蛋白11抗體
Annexin A13膜粘連蛋白13抗體
phospho-ACTH (Ser168)磷酸化促腎上腺皮質激素ACTH抗體
phospho-AKT1 (Ser246)磷酸化蛋白激酶AKT1抗體
phospho-AKT1/3 (Tyr473)磷酸化蛋白激酶B抗體
phospho-alpha 1 Sodium Potassium ATPase (Tyr260) 磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
phospho-alpha Adducin(Ser436)磷酸化內收蛋白a1抗體
phospho-AMPK alpha 1 (Ser487)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
phospho-AMPK alpha 2 (Ser345)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體
ASAH1酸性神經酰胺酶1抗體
ADRM1粘附調節分子1抗體
Aphrodisin氣味結合蛋白抗體
ALDH2乙醛脫氫酶2抗體
Annexin A10膜粘連蛋白10抗體
Anterior Gradient 2前梯度同源蛋白2抗體
ALDH1B1乙醛脫氫酶5抗體
ALF通用轉錄因子IIA樣因子抗體
ATG4D自噬相關蛋白4D抗體
ATG9A自噬相關蛋白9A抗體
Aldolase C醛縮酶C抗體
Aspartate Aminotransferase穀草轉氨酶抗體
ABCG5三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員5抗體
ABCG8三磷酸腺苷結合轉運蛋白G超家族成員8抗體
ACADL酰基脫氫酶長鏈抗體
ACADM酰基脫氫酶中鏈抗體
ACADS酰基脫氫酶短鏈抗體