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      土壤过氧化氢酶(S-CAT)操作步骤
      点击次数 :1057 更新时间:2021-09-01

      操作步骤 :


      1. 标准品的稀释与加样 :在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一 、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl ,混匀 ;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五 、第六孔中 ,再在第五 、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀 ;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七 、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl ,混匀后从第七 、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl ,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L) 。

      2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部 ,尽量不触及孔壁 ,轻轻晃动混匀 。

      3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

      4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用 。

      5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体 ,甩干 ,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

      6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

      7. 温育 :操作同3 。

      8. 洗涤:操作同5 。

      9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.

      10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

      11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟 。

      泛素激活酶E1抗体

      表皮生长因子受体抗体

      Ets转录因子家族ets1抗体

      早期B淋巴细胞因子1抗体

      内皮素受体A抗体

      表皮生长因子受体抗体

      表皮生长因子受体抗体

      早期生长应答蛋白1抗体

      表皮膜蛋白1抗体

      内皮细胞受体蛋白激酶A抗体

      蛋白激酶A4抗体

      前列腺素E受体3抗体

      雌激素受体α抗体

      ENPP3抗体IgG

      丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

      胚胎干细胞RAS蛋白抗体

      转录因子ETV7抗体

      ELAVL1抗体

      胚胎干细胞相关转录因子1抗体

      表皮生长因子受体III型突变体抗体

      红细胞膜蛋白条带EPB41L5抗体

      早期发育调控蛋白1抗体

      转录因子ETV6抗体

      跨膜通道蛋白8抗体

      尤文氏肉瘤相关EWS蛋白抗体

      核酸外切酶1抗体

      多发性肌炎/硬皮病自身抗原抗体2抗体


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