操作流程 ：

1. 從室溫平衡20min後的鋁箔袋中取出所需板條 ，剩餘板條用自封袋密封放回4℃ 。
2. 設置標準品孔和樣本孔 ，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL ；
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL ；空白孔不加 。
4. 除空白孔外 ，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔 ，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min 。
5. 棄去液體 ，吸水紙上拍幹 ，每孔加滿洗滌液（350μL） ，靜置1min ，甩去洗滌液 ，吸水紙上拍幹 ，如此重複洗板5次（也可用洗板機洗板） 。
6. 每孔加入底物A 、B各50μL ，37℃避光孵育15min 。
7. 每孔加入終止液50μL ，15min內 ，在450nm波長處測定各孔的OD值 。

試劑使用須知 ：
（1）請參照相關法規 、文獻 、MSDS等信息 ，理解並掌握好試劑的特性 ，再進行安全操作 。
（2）通常購買試劑時一定要想到一次性用完 。若估算不足有剩餘的話 ，更加注意其他保管和管理 。
（3）萬一試劑操作者並非專業技術人員 。必須在專業人士的指導監督下進行操作 。對於使用後的廢棄物 ，不要或者舊的試劑 ，應按照相關法律法規正當處理 。
（4）購買後 ，請務必確認標簽上的注意事項 ；做好預防顛倒 ，摔壞的措施和管理體製 ；在使用前再次確認標簽上的注意事項 ，做好必要的安全對策 ；對沒有標明其危害特性 、有害特性的 ，也要慎重地進行操作 ；必須帶好防護用具 ，小心翼翼進行操作 。

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