實驗步驟
:
①產品僅用於科研取凍存已裂解的細胞
,室溫放置5分鍾使其*溶解
。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang
,蓋緊管蓋
。手動劇烈振蕩管體15秒後
,15到30℃孵育2到3分鍾
。4℃下12000rpm離心15分鍾
。離心後混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相
,中間層以及無色水相上層
。RNA全部被分配於水相中
。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
。
③RNA沉澱 將水相上層轉移到一幹淨無RNA酶的離心管中
。加等體積異丙醇混合以沉澱其中的RNA
,混勻後15到30℃孵育10分鍾後
,於4℃下12000rpm 離心10分鍾
。此時離心前不可見的RNA沉澱將在管底部和側壁上形成膠狀沉澱塊
。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配製)
,清洗RNA沉澱
。混勻後
,4℃下7000rpm離心5分鍾
。
⑤RNA幹燥 小心吸去大部分乙醇溶液
,使RNA沉澱在室溫空氣中幹燥5-10分鍾
。
⑥溶解RNA沉澱 溶解RNA時
,先加入無RNA酶的水40μl用槍反複吹打幾次
,使其*溶解
,獲得的RNA溶液保存於-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零
。然後取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)後
,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值
,測定RNA溶液 濃度和純度
。
酸性磷酸酶抗體
極光激酶A相互作用蛋白1抗體
載脂蛋白樣蛋白6抗體
凋亡相關蛋白TGFb信號抗體
A2LD1蛋白抗體
α1,4-N-乙酰葡糖胺轉移酶α4Gn-T抗體
芳香乙酰胺脫乙酰基酶抗體
芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白4抗體
氨基乙二酸半醛脫氫酶磷酸泛酰巰基乙胺轉移酶抗體
賴氨酸酮戊二酸還原酶抗體
錨蛋白重複域6抗體
酶2抗體
醛固酮還原酶家族1成員C3抗體
促腎上腺皮質激素受體
褐黑素相關蛋白ART抗體
腎上腺皮質線粒體鐵氧還蛋白抗體
Allgrove綜合征相關蛋白抗體
腺相關病毒5 VP1抗體
脂肪醛脫氫酶抗體
抗利尿激素1A抗體
抗利尿激素受體1B抗體
二磷酸腺苷核糖基化因子核苷酸交換因子2抗體
α增強子結合蛋白1抗體
脊髓小腦共濟失調10抗體
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體
腺苷三磷酸結合盒轉運體12抗體
腺苷三磷酸結合盒轉運體9抗體
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