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      鹿胰岛素样生长因子结合蛋白3 ELISA试剂盒操作步骤
      点击次数:789 更新时间:2021-02-04

      操作步骤 :

      1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在*、第二孔中分别加标准品100μl ,然后在* 、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三 、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul ,混匀 ;混匀后从第五 、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七 、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七 、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl ,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
      2. 加样 :分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂 ,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl ,然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍) 。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
      3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
      4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
      5. 洗涤 :小心揭掉封板膜 ,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次 ,拍干 。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
      7. 温育 :操作同3。
      8. 洗涤 :操作同5 。
      9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl ,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
      10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

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