操作流程 :
1. 根據要保存的各樣本的體積
,計算出所需RNAwait用量
。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait)
;離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml
。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中
;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀
,立即*浸入RNAwait中
。組織的厚度一定要<0.5 cm
。組織過厚則RNAwait不能有效滲入
,組織中間部位的RNA不能受到保護
。較小的組織(如大鼠的腎髒
、脾髒
,小鼠的大部分器官)取下後可以直接浸入RNAwait
。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait後置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的
,這樣可使RNAwait*滲入到組織中)
,然後轉移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時仍為液態
,有結晶析出
,是正常情況)
;或者在4℃冰箱過夜後
,從RNAwait中取出組織塊
,轉移到-80℃冰箱
。在RNAwait中保存的標本
,反複凍融至室溫20次不影響RNA的質量
。
性能:
1. 準確性
:標準品線性回歸與預期濃度相關係數R值
,大於等於0.9900
。
2. 靈敏度
:檢測濃度小於0.1 U/mL
。
3. 特異性
:不與其它可溶性結構類似物交叉反應
。
4. 重複性
:板內
、板間變異係數均小於15%
。
5. 貯藏
:2-8℃
,避光防潮保存
。
6. 有效期
:6個月
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