保溫方法:
溫育常采用的溫度有43℃
、37℃
、室溫和4℃等
。37℃是實驗室中常用的保溫溫度
,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度
。在建立ELISA方法作反應動力學研究時
,實驗表明
,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1~2小時,產物的生成可達
。為加速反應
,可提高反應的溫度
,有些試驗在43℃進行
,但不宜采用更高的溫度
。抗原抗體反應4℃更為*
,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中,以形成zui多的沉澱
。但因所需時間太長
,在elisa試劑盒白介素類中一般不予采用
。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特製的電熱塊外
,一般均采用水浴
,可將ELISA試劑盒板置於水浴箱中
,ELISA板底應貼著水麵
,使溫度迅速平衡
。為避免蒸發
,板上應加蓋
,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔
,此時可讓反應板漂浮在水麵上
。若用保溫箱
,ELISA試劑盒應放在濕盒內
,濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等
,在盒底墊濕的紗布
,zui後將ELISA板放在濕紗布上
。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度
,特別是在氣溫較低的時候更應如此
。無論是水浴還是濕盒溫育
,反應板均不宜疊放
,以保證各板的溫度都能迅速平衡
。室溫溫育的反應
,操作時的室溫應嚴格限製在規定的範圍內
,標準室溫溫度是指20~25℃
,但具體操作時可根據說明書的要求控製溫育
。室溫溫育時
,elisa試劑盒 白介素類隻要平置於操作台上即可
。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確
。為保證這一點
,一個人操作時
,一次不宜多於兩塊板同時測定
。