樣本無法計算到數值
1 標曲選擇不合適選擇合適的標曲擬合
;
2 樣本含量很低
,低於靈敏度無法被檢測到嚐試濃縮樣本或使用高敏ELISA試劑盒檢測
3樣本含量很高
,超過標曲建議進行預實驗摸索稀釋倍數
,確保樣本OD值落在標曲範圍內標曲高濃度間無明顯趨勢
1如OD值靠譜
,但是僅無梯度
,則顯色過度TMB顯色體係中建議根據S1
,S2顏色進行判斷
,當S1
,S2深藍色
,有明顯梯度
,S5有淡藍色時即可終止
。
2僅作單波長檢測。由於參考波長讀取非特異性檢測
,如指紋
、劃痕
、水漬等
,對結果也有影響
。建議終結果以雙波長為準確
。
特點
:
1.專一性強
。抗原與抗體的免疫反應是專一反應
,而免疫酶技術以免疫反應為基礎
,所檢測的對象是抗原(或抗體)
,使用的抗體除標記了酶以外
,與普通抗體的免疫反應特性並無多大差別
。
2.靈敏度高
。由於抗體聯結上了酶
,因此
,借助於酶與底物的顯色反應
,顯示抗原與抗體的結合
,大大提高了檢測的靈敏性
,使檢測水平接近放射免疫測定法
。
3.樣品易保存
。經過酶反應顯示的有色產物大多比較穩定
,因此有利於樣品的保存
。
4.結果易觀察
。對檢測結果即可用肉眼觀察
,又可用顯微鏡觀察
,也可以用分光光度計進行比色測定
,還可用顯微鏡觀察
。這是因為某些酶反應產物能使電子密度發生改變
,從而引起被檢測物的顯示
。
5.可以定量測定
。溶液中的抗原物質
,應用酶免吸附技術進行比色測定
,依據光密度值的變化
,可以定量
。預計用細胞分光光度計可對組織內的抗原進行免疫酶技術的定量測定
。
6.可以大規模測定樣品
。如有成千上萬份樣品需要進行檢測
,免疫酶技術都能在較短時間內完成
。
7.儀器和試劑簡單
。對免疫沒技術來說
,不需要熒光顯微鏡
,也不需要測定放射性的特殊儀器
,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑
,普通實驗室及應用單位均易購置.