反應步驟:

（1）嚴格按照試劑說明書進行操作 。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min 。
（2）加樣後及時放人孵箱 。標本較多時 ，要分批操作 。按說明步驟嚴格控製操作時間 ，防止孵育時間人為延長 ，導致非特異性結合緊附於反應孔周圍 ，難以清洗* 。
（3）封板溫育時 ，各孔一定要封嚴 ，防止陽性標本的液體蒸發 ，產生周邊現象從而導致“花板"的出現 。 
（4）用洗板機洗板時 ，保證洗液注滿各孔 ，洗板針暢通 ，洗完板後在吸水紙（選擇幹淨 、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍幹 ：還要防止針口有纖維蛋白或異物 ，ELISA試劑盒這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板"的出現 。
（5）合理安排檢測量 ，以免反應板過多造成洗板等待時間長 。
（6）加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹 。
（7）顯色劑盡量在臨用前配製 ，堅持不用過期顯色劑 ，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用 。
（8）加樣時保持顯色劑不外流 ；A 、B液應避免接觸金屬器械 。加終止液時應避免產生氣泡 。
（9）應保證酶標板清潔 ，整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸 。以上的措施可以使“花板"降至zui低限度 。ELISA試劑盒豚鼠從而提高檢測的特異性 。並得到更準確 、可靠的實驗結果 。

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