樣本實驗前準備
:
ELISA試劑盒液體樣本
:包括血清
、血漿
、尿液
、胸腹水
、腦脊液
、細胞培養上清等
。
1血清
室溫血液自然凝固10-20分鍾後
,離心20分鍾左右2000-3000轉/分
。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
2血漿
:
應根據標本的要求選擇EDTA
、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑
,混合10-20分鍾後
,離心20分鍾左右2000-3000轉/分
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。
3尿液
:
用無菌管收集
。離心20分鍾左右2000-3000轉/分
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心
。胸腹水
、腦脊液參照此實行
。
4細胞培養上清
:
檢測分泌性的成份時
,用無菌管收集
。離心20分鍾左右2000-3000轉/分
。仔細收集上清
。
5培養細胞
檢測細胞內的成份時
,用PBSPH7.2-7.4稀釋細胞懸液
,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反複凍融或加入組織蛋白萃取試劑
,以使細胞破壞並放出細胞內成份
。離心20分鍾左右2000-3000轉/分
。仔細收集上清
。保存過程中如有沉澱形成
,應再次離心。
6組織標本
切割標本後
,稱取重量
。加入一定量的PBS
,PH7.4
。用液氮迅速冷凍保存備用
。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度
。加入一定量的PBSPH7.4
,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化
。離心20分鍾左右2000-3000轉/分
。仔細收集上清
。分裝後一份待檢測,其餘冷凍備用
。