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如何正確使用GSH 酶聯免疫分析試劑盒
?
點擊次數:464 更新時間
:2020-02-25
如何正確使用GSH 酶聯免疫分析試劑盒
?
GSH 酶聯免疫分析試劑盒用於測定人血清
、血漿及相關液體樣本中脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)的含量
。
操作步驟
:
1.標準品的稀釋
:本試劑盒提供原倍標準品一支
,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋
。
24μg/L 5號標準品 150μl 的原倍標準品加入 150μ1 標準品稀釋液
12μg/L 4號標準品 150μl 的5號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
6μg/L 3號標準品 150μl 的4號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
3μg/L 2號標準品 150μl 的3號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
1.5μg/L 1號標準品 150μl 的2號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
2.加樣
:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑
,其餘各步操作相同)
、標準孔
、待測樣品孔
。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl
,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl
,然後再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)
。加樣將樣品加於酶標板孔底部
,盡量不觸及孔壁
,輕輕晃動混勻
。
3.溫育
:用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾
。
4.配液
:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
。
5.洗滌
:小心揭掉封板膜
,棄去液體
,甩幹
,每孔加滿洗滌液
,靜置30秒後棄去
,如此重複5次
,拍幹
。
6.加酶
:每孔加入酶標試劑50μ1
,空白孔除外
。GSH 酶聯免疫分析試劑盒
7.溫育
:操作同3
。
8.洗滌
:操作同5
。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl
,再加入顯色劑B50μl
,輕輕震蕩混勻
,37℃避光顯色15分鍾
。
10.終止
:每孔加終止液50μl
,終止反應(此時藍色立轉黃色)
。
11.測定
:以空白空調零
,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)
。測定應在加終止液後15分鍾以內進行
。計算以標準物的濃度為橫坐標
,OD值為縱坐標
,在坐標紙上繪出標準曲線
,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度
;再乘以稀釋倍數
;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式
,將樣品的OD值代入方程式
,計算出樣品濃度
,再乘以稀釋倍數
,即為樣品的實際濃度。GSH 酶聯免疫分析試劑盒
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